強(qiáng)磁場(chǎng)誘變選育提高Cunninghamella echinulataγ-亞麻酸產(chǎn)量的研究.pdf

1、多不飽和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acids，PUFAs）在膳食、化妝品和醫(yī)藥領(lǐng)域有著重要的意義。γ-亞麻酸（γ-Linolenic acid，GLA）是重要的必需脂肪酸，其屬于omega-6系不飽和脂肪酸，是具有18個(gè)碳原子，三個(gè)雙鍵的直鏈脂肪酸，稱(chēng)為18:3n-6或6,9,12-十八碳三烯酸，順-6，順-9，順-12-十八碳三烯酸。GLA在自然界少量存在孢子植物的油中，其主要來(lái)源是月見(jiàn)草種籽油，但難以滿足市

2、場(chǎng)需求。采用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)GLA成為GLA的替代來(lái)源，產(chǎn)油真菌如Cunninghamella echinulata由于含有較高含量的PUFA，成為PUFAs的生產(chǎn)菌株。
　　本論文采用不同強(qiáng)度脈沖磁場(chǎng)對(duì)產(chǎn)油真菌Cunninghamella echinulata的孢子懸浮液進(jìn)行誘變，稀釋分離培養(yǎng)得到64株誘變株。通過(guò)尼羅紅染色和熒光顯微鏡鏡檢，初篩出3株有望高產(chǎn)油脂的誘變株。對(duì)3株誘變株進(jìn)行發(fā)酵復(fù)篩，與對(duì)照相比，3株誘變株Mut-

3、29，Mut-15和Mut-64 GLA產(chǎn)量分別提高了45.68％，21.97％和20.94％，誘變株Mut-29生物量、油脂含量、油脂產(chǎn)量、GLA含量和GLA產(chǎn)量分別提高了4.55％,21.96％,26.21％,15.38和45.68％，為最佳誘變株。
　　進(jìn)一步研究了碳氮源、C/N、培養(yǎng)溫度、pH、金屬離子、誘導(dǎo)物對(duì)突變株Mut-29生物量、油脂和GLA積累的影響，以8％葡萄糖，1％黃豆粉為基質(zhì)，150rpm，28℃培養(yǎng)7天，

4、誘變株Mut-29的生物量、油脂含量、油脂產(chǎn)量、GLA含量和GLA產(chǎn)量分別提高了7.88％，18.07％27.38％，1.28％和27.93％，GLA產(chǎn)量達(dá)到1311mg/L，在同樣條件下，以0.5％硝酸鉀代替1％黃豆粉，GLA產(chǎn)量達(dá)到1282mg/L，比對(duì)照高出29.07％；以葡萄糖為碳源、硝酸鉀為氮源，C/N為50:1時(shí)，GLA產(chǎn)量最高，為1214mg/L，提高了29.70％；使用0.5％混合氮源GLA產(chǎn)量達(dá)到1225mg/L。pH

5、對(duì)GLA產(chǎn)量影響不大，與對(duì)照相比，從pH5.0-6.5，Mut-29GLA產(chǎn)量增加了14.70％-41.94％。低溫有利于GLA合成但影響菌體生長(zhǎng)，不適合GLA生產(chǎn)。金屬離子Mg2+，Zn2+和Fe2+對(duì)GLA合成稍有促進(jìn)，但Zn2+抑制真菌生長(zhǎng)和油脂積累。接種前加入誘導(dǎo)劑乙醇和甲醇，盡管GLA含量有提高，由于誘導(dǎo)劑抑制菌體生長(zhǎng)和油脂積累而不利于GLA生產(chǎn)。
　　總之，強(qiáng)磁場(chǎng)誘變是一種有效的提高微生物油脂和GLA產(chǎn)量的誘變方法。得