奧司他韋分子印跡聚合物的合成與評價.pdf

1、分子印跡聚合物(MIP)具有分子識別性強、固定相制備簡便快速、性質(zhì)比較穩(wěn)定、溶劑消耗量小、模板和MIP都可以回收再利用等優(yōu)點,在對映體和異構(gòu)體的分離、固相萃取、緩控釋給藥系統(tǒng)、臨床藥物分析、膜分離技術(shù)、模擬酶催化、化學(xué)仿生傳感器等領(lǐng)域中展現(xiàn)了良好的應(yīng)用前景。以MIP為基礎(chǔ),針對傳統(tǒng)抗病毒藥物篩選既繁瑣危險性較高,又對實驗條件要求極高的缺點,建立抗病毒中藥有效成分分離篩選鑒定一體化的非生物學(xué)藥物篩選技術(shù)具有重要的應(yīng)用價值。本文以奧司他韋(

2、OS)為模板分子,用本體聚合法合成了分子印跡聚合物并進行評價,期以應(yīng)用OSMIP-HPLC-MS法篩選新型抗流感病毒化合物。
　　 1、概述了抗流感病毒的藥物及其作用原理,非生物學(xué)藥物篩選方法的定義及各種方法的研究現(xiàn)狀,分子印跡聚合物的合成方法、試劑選擇及其在有效成分群的分離、活性成分篩選和抗病毒藥物領(lǐng)域的應(yīng)用情況。
　　 2、建立了薄層色譜法對OS的快速攀別。以甲醇-乙酸乙酯-甲苯-三乙胺(2:4:2:1)為展開劑,硅

3、膠GF254板展開后,254 nm下出現(xiàn)暗斑,Rf約為0.5。
　　 3、應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀,建立OS的含量測定方法。應(yīng)用C18柱,流動相甲醇-水(75:25,V／V),結(jié)果顯示OS準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+m／z313.30,子離子m／z166.20和208.20分別為定量離子和輔助定性離子,在5～160 ng·mL-1的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(R2=0.9995),平均回收率為100.94％,日內(nèi)精密度和日間精密度分別為99.

4、89％和98.90％。
　　 4、以印跡聚合物對OS的吸附量為指標(biāo),應(yīng)用U8(82×42)均勻設(shè)計優(yōu)化了OS—MIP的合成參數(shù)。優(yōu)化后的結(jié)果為:0.1 mmol的OS,功能單體0.69 mmol,EGDMA5 mmol,30％AA+70％4-VP作為功能單體,致孔劑選用甲苯。所合成的OS-MIP和NIP對OS的吸附最分別為220.9543μg·50mg-1和12.0817μg·50 mg-1。
　　 5、應(yīng)用掃描電鏡,對

5、聚合物進行形態(tài)學(xué)觀察。合成的OS-MIP與NIP相比質(zhì)地較松,易碎。從掃描電鏡照片中可以清楚的看到位于OS-MIP網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的小孔。相比于OS—MIP,NIP表面較為光滑,孔穴也比較小而且數(shù)最少。
　　 6、為了確定OSMIP-HPLC自制柱對模板分子的吸附能力,應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進行了OSMIP-HPLC自制柱對OS、阿司匹林、綠原酸、連翹苷及混合物分離情況的測定。結(jié)果顯示OSMIP-HPLC柱能夠完全地分離模板分子及其他化

6、合物。阿司匹林、綠原酸、連翹苷的保留時間在35min左右,模板分子的保留時間在110 min左右(理化性質(zhì)不同,保留時間會有所變化)。
　　 從以上結(jié)果可以看出,應(yīng)用薄層色譜檢測OS的方法操作簡便、快速,可用于市面上OS的真?zhèn)舞b別；應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進一步測定OS含量的方法,為下一步檢測分子叩跡聚合物對模板分子的吸附量提供了技術(shù)支持；應(yīng)用均勻設(shè)計優(yōu)化OS-MIP合成參數(shù),得到的OS—MIP對OS有較強的吸附性；對聚合物進行掃描