三葉木通組織培養(yǎng)及多倍體誘導(dǎo).pdf

1、本研究以野生三葉木通為試驗材料，通過組織培養(yǎng)建立了三葉木通離體快繁體系，并用秋水仙素處理叢生芽誘導(dǎo)多倍體，對多倍體進(jìn)行了鑒定，為新品種的培育提供了技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下：
　　1.外植體的選擇及處理。在不同外植體經(jīng)酒精和升汞組合消毒的研究中，果實里取出的種子為最佳的外植體。消毒方式以75％酒精處理15 s，然后0.1％ HgCl2處理7 min為好。三葉木通種子出苗的優(yōu)化條件為種子沿背腹線縱切成半，接種于MS+2Ca2++6-

2、BA1.0 mg/L+NAA0.3 mg/L+活性炭0.1 g/L的培養(yǎng)基中，25℃條件下12 h/d的光照處理，光照強度為1000 lx。
　　2.種子愈傷組織的誘導(dǎo)及分化。種子愈傷組織誘導(dǎo)較優(yōu)的培養(yǎng)基為MS+2,4-D1.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L，誘導(dǎo)率為32.5%。種子愈傷在MS+2,4-D1.5 mg/L+6-BA0.1 mg/L的培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)后能得到胚性愈傷組織。該胚性愈傷組織可以在MS+6-BA2.0

3、 mg/L+NAA0.3 mg/L+75 g/L香蕉泥的培養(yǎng)基中分化，分化率為11.7%。
　　3.叢生芽的誘導(dǎo)及生根。腋芽誘導(dǎo)的優(yōu)化培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg/L。雖然本研究得出在MS+6-BA2.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L的培養(yǎng)基中帶腋芽莖段可被誘導(dǎo)出平均芽數(shù)多達(dá)8個芽，但除了主芽外并未得到其他具有分化出腋芽能力的芽。本研究也并未成功地對單個腋芽誘導(dǎo)出叢生芽。而在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.

4、3 mg/L的培養(yǎng)基中，實生苗平均增殖數(shù)最高，所以實生苗叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基選擇此培養(yǎng)基。單個腋芽不能在不同激素組合的培養(yǎng)基中生根，而叢生芽塊能在不同激素組合的培養(yǎng)基中生根。
　　4.多倍體的誘導(dǎo)及鑒定。以三葉木通叢生芽為外植體，借助離體組織培養(yǎng)技術(shù)，研究不同濃度和時間的秋水仙素對三葉木通多倍體誘導(dǎo)的影響。研究結(jié)果表明，0.3％濃度的秋水仙素溶液搖床振蕩處理叢生芽24 h，其多倍體的誘導(dǎo)效果較好。采用染色體計數(shù)法，對未加倍處理的叢生芽