多酚化合物對蝦類過敏原免疫活性的影響及抗過敏活性的研究.pdf

1、為了改善食物過敏患者的生活質(zhì)量，提高食品安全的水平，國內(nèi)外食品領(lǐng)域?qū)＜抑饕獜膬蓚€(gè)方面降低過敏原對過敏患者的影響。一是通過特殊的技術(shù)手段降低食物過敏原的活性，一是在食品中添加抗過敏活性成分。本論文以具有廣泛活性的多酚化合物為研究對象，研究其對蝦類過敏原免疫活性的影響及其抗過敏活性，并通過過敏動(dòng)物模型研究其抗過敏的機(jī)制，為降低食物過敏原的危害提供新的途徑。主要結(jié)果如下：
　　 1、選取茶多酚、阿魏酸等常見的多酚化合物，與蝦類過敏原抽

2、提物發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，研究多酚化合物對蝦類過敏原抽提物免疫活性的影響。結(jié)果表明，阿魏酸、茶多酚均能與蝦類過敏原抽提物發(fā)生反應(yīng)，使蝦過敏原抽提物溶液中的過敏原蛋白濃度減小，其中阿魏酸使其免疫活性降低了97.1％，茶多酚使其免疫活性降低了99.9％。但是阿魏酸、茶多酚與蝦蛋白絡(luò)合產(chǎn)生的沉淀復(fù)溶后，其過敏原的免疫活性并未明顯降低，阿魏酸復(fù)合物的免疫活性降低29.4％，而茶多酚復(fù)合物的免疫活性升高了15.8％。這可能是由于多酚化合物與蝦過敏原絡(luò)合后

3、，改變了其表位構(gòu)象，使某些原本隱藏的抗原表位暴露出來，當(dāng)過敏原復(fù)溶后，更多的抗原表位與抗體反應(yīng)，從而使免疫活性升高。
　　 2、對于多酚抗過敏活性的探討，采用了透明質(zhì)酸酶活性的體外抑制效果進(jìn)行篩選。主要選取五種分別屬于四個(gè)不同海藻門的海藻，測定其乙醇粗提物對透明質(zhì)酸酶的抑制活性。研究結(jié)果表明萱藻抽提物的抑制效果最佳，其IC50值為0.67mg/mL，高于常規(guī)用于抑制透明質(zhì)酸酶活性的藥物--色甘酸二鈉(IC50=1.13 mg/m

4、L)，是一種潛在的天然抗過敏生物資源。
　　 3、選取7種國內(nèi)外常見的大孔樹脂，對萱藻中的抗過敏活性成分進(jìn)行分離純化。通過對吸附量和解吸率的比較，發(fā)現(xiàn)XDA-1型大孔樹脂具有良好的吸附性能和解吸效果。它對萱藻多酚的最適吸附條件為：上樣樣品濃度為1.0mg/mL，pH5.83，上樣速率為1.0mL/min。最適解吸條件為：乙醇濃度80％，解吸速率1.0mL/min。通過XDA-1的分離純化后，得到純度為45.27％的萱藻多酚，其比

5、活性提高1.94倍。
　　 4、為了探討該成分抑制過敏反應(yīng)的機(jī)制，本研究利用過敏動(dòng)物模型對其抗過敏機(jī)理進(jìn)行了探討。首先建立對凡納濱對蝦過敏的BALB/c小鼠模型，同時(shí)灌胃萱藻提取物，檢測其體內(nèi)抗過敏活性，探討抗過敏機(jī)理。研究證實(shí)，高劑量萱藻提取物可降低過敏小鼠血清中特異性IgE、IL-4水平，其效果與抗過敏藥物色甘酸二鈉接近。其中，高劑量預(yù)防組小鼠與過敏模型組小鼠相比其特異性IgE、IL-4含量分別降低了60.05％和33.74

6、％，高劑量治療組小鼠與過敏模型組小鼠相比其特異性IgE、IL-4含量分別降低了67.90％和34.83％。且高劑量預(yù)防組和治療組過敏小鼠血清中的IL-4/IFN-γ比率也由過敏模型組的0.1556 pg/ng分別降至0.1057pg/ng和0.1243pg/ng。以上結(jié)果提示我們萱藻提取物對食物過敏反應(yīng)的抑制機(jī)理可能是通過降低過敏反應(yīng)中IL-4的大量產(chǎn)生，從而抑制Th2/Th1比值升高現(xiàn)象，恢復(fù)Th1、Th2細(xì)胞間的平衡，進(jìn)而抑制IgE