Gemini陽離子表面活性劑反膠束液液提取菠蘿皮中菠蘿蛋白酶的研究.pdf

1、反膠束萃取技術將提純與濃縮集于一起，可以高效節(jié)能地從復雜體系中提取純化出目標蛋白質(zhì)并保持其生物活性。與傳統(tǒng)提取方法相比，反膠束萃取技術具有極大的技術優(yōu)勢與應用潛能。因此，該技術在蛋白質(zhì)的提取分離中越來越受到關注。
　　目前反膠束萃取技術中所使用的表面活性劑多為傳統(tǒng)表面活性劑。本論文分別使用兩種新型表面活性劑-季銨鹽Gemini表面活性劑二溴化—雙（二甲基十二烷基）辛二銨(C12C8C12)和二溴化—雙（二甲基十二烷基）十二銨(C1

2、2C12C12)所形成的反膠束對菠蘿皮中的菠蘿蛋白酶進行了萃取，發(fā)現(xiàn)Gemini表面活性劑反膠束對菠蘿蛋白酶的萃取效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)表面活性劑（如十二烷基三甲基溴化銨）反膠束的萃取效果。通過系統(tǒng)研究萃取過程中各項參數(shù)對Gemini表面活性劑反膠束萃取效果的影響，發(fā)現(xiàn)萃取過程中的各項參數(shù)，如表面活性劑的結構與濃度、水相pH值、離子強度、菠蘿蛋白酶粗提液稀釋倍數(shù)等都在萃取過程中起著重要的作用，從而影響了菠蘿蛋白酶的總萃取效率、活性回收率及純化

3、倍數(shù)。使用C12C8C12/正己烷/正己醇/水反膠束體系從菠蘿皮中提取菠蘿蛋白酶時，最優(yōu)提取工藝參數(shù)為:前萃取水相pH值為8.0，前萃取水相中NaCl濃度為0.1M，后萃取水相pH值為4.2，后萃取水相中KBr濃度為0.5 M，C12C8C12濃度為0.03 g/ml，菠蘿蛋白酶粗提液的稀釋倍數(shù)為25倍;最佳萃取條件下，菠蘿蛋白酶的總萃取效率、活性回收率和純化倍數(shù)分別為50％、163％和3.3。使用C12C12C12/正己烷/正己醇/水

4、反膠束體系從菠蘿皮中提取菠蘿蛋白酶時，最佳工藝參數(shù)為:前萃取水相pH值為10.0，前萃取水相中NaCl濃度為0.1M，后萃取水相pH值為4.2-5.6，后萃取水相中KBr濃度為0.25-1.0 M，C12C12C12濃度為0.005-0.04 g/ml，菠蘿蛋白酶粗提液的稀釋倍數(shù)為15-35倍;最佳萃取條件下，菠蘿蛋白酶的總萃取效率、活性回收率和純化倍數(shù)分別為50％-59％、140％-160％和1.8-3.2。
　　因此，C12C