多功能聚合物囊泡用于蛋白質(zhì)的高效包裹及肝靶向的細(xì)胞內(nèi)釋放.pdf

1、由雙親性聚合物自組裝形成的聚合物囊泡具有被疏水性膜和外界隔離開的親水性內(nèi)腔、能包裹親水性和疏水性藥物，且其穩(wěn)定性高、壁膜性質(zhì)可調(diào)，已成為一類重要的蛋白質(zhì)藥物載體，在腫瘤治療上具有巨大潛力。在本論文中，我們?cè)O(shè)計(jì)制備了肝癌靶向、還原敏感、具有不對(duì)稱膜結(jié)構(gòu)的生物可降解聚合物囊泡用于蛋白質(zhì)的高效包裹及肝癌細(xì)胞內(nèi)的釋放。該囊泡基于偶聯(lián)半乳糖的聚乙二醇-聚己內(nèi)酯（Gal-PEG-PCL）（提供肝靶向性）、PEG-PCL-聚甲基丙烯酸二乙氨基乙酯（P

2、EG-PCL-PDEA）（形成具有不對(duì)稱膜的囊泡、高效裝載蛋白和內(nèi)涵體逃逸）和PEG-SS-PCL（提供還原敏感性）三個(gè)組分。我們系統(tǒng)地研究了囊泡體系中PEG-SS-PCL的含量及Gal-PEG-PCL的含量對(duì)囊泡的粒徑、還原敏感性、蛋白質(zhì)藥物的包裹量和釋放速度，或是細(xì)胞內(nèi)吞和抗癌活性等方面的影響。在第二章我們主要研究了由PEG-PCL-PDEA/PEG-SS-PCL組成的兩組分囊泡。研究發(fā)現(xiàn)，囊泡的粒徑隨著PEG-SS-PCL含量由0

3、增加至100%而由95.5納米增加到210.2納米。由于囊泡內(nèi)表面的PDEA鏈段的質(zhì)子化，使其與蛋白質(zhì)之間有著強(qiáng)靜電相互作用，所以該囊泡對(duì)蛋白質(zhì)牛血清蛋白（BSA）、細(xì)胞色素C（CC）和卵清蛋白（OVA）的包封率高（達(dá)90%）。體外釋放實(shí)驗(yàn)表明，隨著PEG-SS-PCL含量的增多，蛋白質(zhì)釋放速度加快，說明蛋白質(zhì)能夠可控釋放。更可貴的是，釋放出來的蛋白質(zhì)仍然保持了其生物活性。共聚焦激光顯微鏡（CLSM）結(jié)果表明，蛋白質(zhì)能夠被運(yùn)送到癌細(xì)胞的

4、細(xì)胞質(zhì)中，且細(xì)胞質(zhì)中蛋白質(zhì)的量隨PEG-SS-PCL含量的增多而增加。為了進(jìn)一步增強(qiáng)蛋白質(zhì)藥物的抗腫瘤效果，第三章我們研究了Gal-PEG-PCL含量不同的肝靶向聚合物囊泡。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，裝載CC的靶向囊泡在和HepG2肝癌細(xì)胞孵育48小時(shí)后，隨Gal-PEG-PCL含量由0增至10、20、30和40 wt.%，HepG2細(xì)胞的存活率也從81.9%降低到60.6%、49.5%、42.2%和31.5%，揭示了該囊泡的肝靶向性隨著Ga