用于檢測超氧陰離子和多硫化氫的多響應(yīng)熒光探針的合成及應(yīng)用.pdf

1、近幾年的研究表明，超氧陰離子（O2）是存在于細(xì)胞中的眾多活性氧（ROS）中最重要的一種，其在不同的生理和病理過程中起著重要的作用。在廣泛研究一氧化碳和一氧化氮之后，硫化氫（H2S）作為一種內(nèi)源性氣體信號(hào)分子開始被重視，被認(rèn)為可在生命體內(nèi)發(fā)揮重要的作用。在心血管系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)中，H2S都起到了十分重要的調(diào)節(jié)生理功能的作用。通過最近的研究發(fā)現(xiàn)，越來越多的證據(jù)都表明，多硫化氫（H2Sn）實(shí)際上是生理活動(dòng)的信號(hào)分子，硫化氫只是多硫化氫生理活動(dòng)中

2、所釋放的標(biāo)志物，同時(shí)有研究表明，多硫化氫的產(chǎn)生是依賴于活性氧對(duì)細(xì)胞的刺激并產(chǎn)生于線粒體中。我們報(bào)道了兩種用于檢測超氧陰離子和多硫化氫的多響應(yīng)近紅外熒光探針。一種用于檢測細(xì)胞線粒體中的超氧陰離子和多硫化氫，一種用于檢測癌細(xì)胞中的超氧陰離子和多硫化氫。探針利用間硝基苯作為多硫化氫的響應(yīng)基團(tuán)，選取對(duì)芐基氯作為線粒體定位基團(tuán)；生物素作為癌細(xì)胞的定位基團(tuán)。在多種活性氧物種和活性硫物種的存在下，該探針對(duì)超氧陰離子和多硫化氫具有高選擇性。我們還驗(yàn)證了

3、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）對(duì)多硫化氫的產(chǎn)生起著重要的作用。探針還成功的應(yīng)用于檢測活細(xì)胞外源性以及內(nèi)源性的超氧陰離子和多硫化氫，同時(shí)還應(yīng)用于小鼠和荷瘤鼠模型內(nèi)的熒光成像。論文共分為五章，內(nèi)容如下：
　　1、熒光探針的熒光成像技術(shù)、花菁熒光團(tuán)和熒光探針的設(shè)計(jì)機(jī)理簡介。綜述了已發(fā)表的用于檢測超氧陰離子的熒光探針和用于檢測多硫化氫的熒光探針，開發(fā)具有多響應(yīng)的近紅外熒光探針對(duì)于研究生命過程具有極其深遠(yuǎn)的意義。

4、
　　2、介紹了新型多響應(yīng)近紅外熒光探針的設(shè)計(jì)和合成的具體步驟，并介紹了熒光探針檢測超氧陰離子和多硫化氫的檢測機(jī)理。
　　3、利用合成的新型熒光探針進(jìn)行體外對(duì)超氧陰離子和多硫化氫的檢測，使用紫外可見分光光度計(jì)和熒光分析儀對(duì)探針的性能進(jìn)行了評(píng)估，同時(shí)對(duì)熒光探針在不同pH值條件下的穩(wěn)定性、選擇性和化學(xué)動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了分析。
　　4、利用合成的熒光探針進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)以及生物體內(nèi)的超氧陰離子和多硫化氫的檢測，使用激光共聚焦顯微鏡和小動(dòng)