基于絲素蛋白的反蛋白石結構三維細胞支架的構建研究.pdf

1、蠶絲是一種古老的天然材料，被人利用的歷史已經有幾千年。絲素蛋白是從蠶絲中提取出來的一種天然蛋白，由18種氨基酸組成，其中富含的甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸多以-Gly-Ala-Gly-Ala-Ser-重復序列的多肽形式存在。絲素蛋白被用作手術縫合材料應用于生物醫(yī)學領域也已有數百年歷史，其優(yōu)異的生物相容性，生物可降解性，良好的機械性能和光學性能在目前的高科技研究平臺下有了更廣闊的應用空間。
　　在治療組織器官損傷方面，組織工程是最具前景的

2、方式，它能夠避免傳統(tǒng)治療方法中會出現(xiàn)的免疫排斥和供體短缺等問題。在組織工程的多個重點問題當中，細胞支架的結構和性質是在材料科學和生物醫(yī)學領域最被廣泛研究的。細胞支架的結構關系到細胞的粘附，細胞的增殖，營養(yǎng)物質的轉移和代謝產物的排出等多個方面。絲素蛋白具有生物相容性和生物可降解性，是一種理想的細胞支架材料，我們希望將絲素蛋白應用于細胞支架中，制備成一種具有良好反蛋白石結構的三維細胞支架。
　　本論文主要研究了一種基于絲素蛋白的反蛋白

3、石結構三維細胞支架的有效制備方法，具體工作如下:
　　1.絲素蛋白的提取及凝膠化試驗:我們從生蠶繭中提取絲素蛋白，并對比了不同提取體系的特點;將提取的絲素蛋白制備成包括水凝膠、海綿、納米纖維薄膜等不同形式，并評估三種不同形式絲素蛋白材料的不同性質。
　　2.絲素蛋白反蛋白石結構三維細胞支架的構建:我們利用自制的微流控裝置制備了三種材料的單分散性模板微球;通過對比確定聚己內酯材料為制備模板微球的最佳方案，并將其模板微球排列成密

4、堆積結構的模板團聚體;將絲素蛋白浸潤到模板團聚體空隙中復制模板結構，最后將模板微球除去即可得到反蛋白石結構的絲素蛋白三維細胞支架。
　　3.絲素蛋白細胞支架的細胞培養(yǎng)試驗:我們研究了絲素蛋白水凝膠材料和海綿材料在細胞培養(yǎng)試驗中的優(yōu)劣，認為海綿形式更好的機械性能使之相較于水凝膠形式更具優(yōu)勢;將絲素蛋白海綿的反蛋白石結構三維細胞支架應用于細胞試驗，利用倒置熒光顯微鏡等方式表征了細胞的粘附和生長情況，并用MTT法評估了細胞的活性和增殖情