基于PCERS技術(shù)和核酸放大技術(shù)的光化學(xué)生物傳感器的研究.pdf

1、近年來，隨著社會經(jīng)濟的不斷發(fā)展與人民生活水平的不斷提高，光化學(xué)生物傳感器在食品安全、環(huán)境安全、公共衛(wèi)生安全等與人們的身體健康和日常生活息息相關(guān)的領(lǐng)域有較大應(yīng)用。本論文研究內(nèi)容如下:
　　霍亂是一種強致病的傳染性疾病，現(xiàn)在它依然是一個全球性的威脅和挑戰(zhàn)，尤其是在一些水資源被污染和沒有足夠醫(yī)療保障的國家和地區(qū)。早期的霍亂毒素蛋白檢測對于預(yù)防霍亂的大范圍爆發(fā)和死亡有重要的意義，霍亂毒素蛋白作為一種獨特的生物標(biāo)記物，必須采用一種公認(rèn)的快速

2、、可靠、價格合理的檢測手段。在論文的第二章中，我們發(fā)展了一種新型的PCERS納米粒子在均相體系中可超靈敏一步檢測霍亂毒素(CT)的新方法。該方法通過以表面修飾拉曼染料的納米金為核，包被一層磷脂雙分子層為殼，磷脂雙分子層間嵌入能夠與霍亂毒素(CT)特異結(jié)合的神經(jīng)節(jié)苷脂GM1，該自組裝的等離子納米探針能夠特異捕獲霍亂毒素(CT)，導(dǎo)致PCERS納米粒子聚集，SERS信號增強。實驗結(jié)果也表明了PCERS納米粒子具有非常高的靈敏性，信背比約為2

3、4倍的情況下，檢測下限可低至0.3pg/mL，具有5個數(shù)量級的動態(tài)范圍，同時還有在復(fù)雜體系中優(yōu)異的抗干擾性。PCERS納米粒子可能成為一個對霍亂毒素做到超靈敏即時檢測并可實現(xiàn)對其診斷及預(yù)防的實用新方法。
　　MicroRNA（miRNAs）是一類小型的內(nèi)源性非編碼蛋白（約19-25個核苷酸）的RNA分子，其在很大范圍的生物過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。然而，miRNA檢測是非常具有挑戰(zhàn)性的，主要歸因于它們的長度非常短，家族miRNA成

4、員之間的序列同源性，不穩(wěn)定性退化和在RNA總體含量中比例非常低。因此，制定快速、特異、靈敏的miRNA檢測方法是非常重要和迫切的。在論文的第三章中，我們開發(fā)了一種基于目標(biāo)物催化發(fā)夾自組裝組件(CHA)和環(huán)狀酶促擴增技術(shù)用于miRNA的檢測，并將其命名為CHA-ERA。CHA擴增是通過目標(biāo)核酸的特異性觸發(fā)引起酶促擴增(ERA)反應(yīng)。該方法應(yīng)用于miRNA的檢測中，CHA-ERA法的檢測下限低至50 fM，可以得到很寬的動態(tài)范圍，檢測上限高