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1、DNA作為遺傳信息的載體,是一類(lèi)極其重要的生物活性分()中起著重要的作用。同時(shí),DNA又是最常用的分子探針,被廣()化學(xué)分析中。核酸適配子(aptamer)是目前應(yīng)用最廣泛的DNA探針,具有很多優(yōu)點(diǎn),如親和力高、選擇性強(qiáng)、易于修飾與分離、穩(wěn)定性好等。目前核酸適配子已經(jīng)被應(yīng)用于生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、藥物合成篩選、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域,有著廣泛的發(fā)展空間和良好的應(yīng)用前景。本論文以核酸適配子為分析對(duì)象,通過(guò)其與量子點(diǎn)和稀土上轉(zhuǎn)換納米晶材料相結(jié)合而成的
2、生物傳感器,成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)低豐度蛋白的測(cè)定和DNA雜交生物過(guò)程的監(jiān)測(cè),取得了滿(mǎn)意的分析效果。本論文包括以下幾個(gè)方面的內(nèi)容:
一.概述了核酸適配子在生物分析中的應(yīng)用
概述了核酸適配子分析技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀,例如SELEX技術(shù)的簡(jiǎn)介、核酸適配子的特點(diǎn)以及與其他分析技術(shù)相結(jié)合等。介紹了核酸適配子在生物分析中的應(yīng)用,并對(duì)核酸適配子未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)及其應(yīng)用領(lǐng)域進(jìn)行了展望,最后著重討論了本論文研究的目的及意義。
二
3、.基于核酸適配子的生物傳感器的研究
本章重點(diǎn)介紹了基于核酸適配子的量子點(diǎn)標(biāo)記夾心法檢測(cè)凝血酶,實(shí)現(xiàn)了對(duì)實(shí)際樣品一人血清中凝血酶的測(cè)定。在本實(shí)驗(yàn)中,CdSe量子點(diǎn)被標(biāo)記到二級(jí)核酸適配子上,作為示蹤劑。當(dāng)CdSe量子點(diǎn)被硝酸溶解后,得到的Cd2+用電化學(xué)溶出伏安法進(jìn)行檢測(cè)。該傳感器可以達(dá)到1pM的檢出限,同時(shí),可以將被測(cè)樣品的消耗體積降低至5μL。結(jié)果表明,該方法具有良好的選擇性并降低了非特異性吸附,因而該方法可以被應(yīng)用于實(shí)際
4、樣品一人的血清中凝血酶的檢測(cè)。這種基于核酸適配子的生物傳感器有望用于篩選復(fù)雜體系中的低含量的生物標(biāo)記物。三.基于稀土上轉(zhuǎn)換材料的DNA檢測(cè)的研究
稀土納米晶上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料與傳統(tǒng)的發(fā)光的生物標(biāo)記材料相比,有很多優(yōu)點(diǎn),如低毒性、化學(xué)穩(wěn)定性高、生物相容性好、光漂白和光損傷低、量子產(chǎn)率高、長(zhǎng)波的激發(fā)光穿透深度大等。本章重點(diǎn)介紹了基于納米金淬滅稀土上轉(zhuǎn)換材料的DNA檢測(cè)。該單分散的稀土納米晶上轉(zhuǎn)換納米粒子被980 nm的長(zhǎng)波紅光激發(fā)
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