酶法催化制備富含EPA和DHA甘油三酯研究.pdf

1、EPA和DHA主要以甘油三酯的形式存在于魚油中，目前市場上的魚油甘油三酯產(chǎn)品中EPA和DHA含量較低，分別為18 wt％、12 wt%。因此，需要通過一定的工藝來提高兩者的含量。本文利用酶法制備EPA和DHA總含量45 wt%以上的高純度甘油三酯型魚油，擬為富含EPA和DHA的甘油三酯型魚油的工業(yè)化生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下：
　?。?）以精煉深海魚油為原料，篩選出一種能高效催化魚油水解富集EPA和DHA的脂肪酶Amano

2、 AY“Amano”400SD，利用Amano AY“Amano”400SD為催化劑，將天然魚油部分水解，對EPA和DHA進行富集，通過對酶添加量、pH值、水油質(zhì)量比、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間進行探討，得到的優(yōu)化條件為，脂肪酶添加量為底物質(zhì)量的0.2‰，反應(yīng)溫度35℃，緩沖溶液pH值6，水油比1：1，反應(yīng)時間10 h，恒溫震蕩器轉(zhuǎn)速200 r/min?？疾炝苏麴s溫度對于分子蒸餾分離魚油脂肪酸和甘油酯混合物的影響，確定了最佳的分子蒸餾溫度為16

3、0℃，經(jīng)過二級分子蒸餾純化分離甘油酯和脂肪酸，收集到的重相為富含EPA和DHA的甘油酯產(chǎn)品，甘油三酯含量為70.7%，甘油二酯含量為28.3%，單酯含量為0.85%，F(xiàn)FA為0.15%，酸值為0.92 mg KOH/g，甘油酯中EPA和DHA由最初的19.3 wt%、13.0 wt%上升到了25.3 wt%、21.6 wt%，EPA回收率68.6%，DHA回收率87.2%。分子蒸餾同時實現(xiàn)了對水解副產(chǎn)物的回收。
　　（2）用水解反

4、應(yīng)得到的甘油酯與濃縮魚油乙酯在真空條件下通過酶催化酯交換反應(yīng)合成甘油三酯，得到的優(yōu)化工藝為，濃縮魚油羥基與混合甘油酯游離羥基為1：1，固定化脂肪酶Lipozyme435添加量為底物質(zhì)量的2%，反應(yīng)溫度60℃，反應(yīng)6 h，反應(yīng)絕對壓力20 Pa，磁力攪拌轉(zhuǎn)速1000 r/min。在此條件下進行酯交換反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)分子蒸餾后甘油酯中甘油三酯的含量可以達到97.6%，甘油酯中EPA和DHA的含量分別為28.2 wt%、21.4 wt%。

5、　　（3）用尿素包合法富集水解副產(chǎn)物脂肪酸中的EPA和DHA，得到的優(yōu)化條件為：尿素/脂肪酸的比例為2.5：1，醇脲比3：1，包合溫度5℃，包合1.5 h，EPA含量從11.4 wt%增到47.8 wt%，DHA含量從2.10 wt%增到11.9 wt%，EPA回收率達70.3%，DHA回收率達90.4%。將富集后的高純度EPA和DHA脂肪酸產(chǎn)物乙酯化后與水解混合甘油酯反應(yīng)，產(chǎn)物甘油酯中甘油三酯的含量為95.9%，甘油酯中EPA和DHA