辛酸甘油二酯酶法合成及其純化工藝的研究.pdf

1、甘油二酯已廣泛應(yīng)用于食品、化妝品和藥品等工業(yè)領(lǐng)域。近年還發(fā)現(xiàn)，甘油二酯具有降低人體血脂，減少內(nèi)臟脂肪、抑制體重增加等作用。但甘油二酯在天然油脂中含量較低，因此，甘油二酯的合成技術(shù)日益受到國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注。目前，甘油二酯的合成方法主要有化學(xué)法和酶法。相較化學(xué)催化劑，酶作為生物催化劑，具有反應(yīng)條件溫和、能耗低、環(huán)境污染小，以及良好的區(qū)域和位置選擇性等優(yōu)點(diǎn)，且酶法合成甘油二酯過(guò)程的副產(chǎn)物少，甘油二酯的純度高、色澤好。因此，酶法制備甘油二酯已成為

2、食品和藥品等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。本論文針對(duì)無(wú)溶劑體系中脂肪酶催化辛酸和甘油制備甘油二酯及其純化工藝進(jìn)行了系統(tǒng)研究。主要內(nèi)容如下：
　　 1．從三種來(lái)源和固定化方式不同的脂肪酶Novozyme 435、Lipozyme RM IM和Lipozyme TL IM中篩選出Novozyme 435為最佳酶催化劑。
　　 2.以Novozyme 435為催化劑，研究了無(wú)溶劑體系下辛酸和甘油直接酯化合成甘油二酯的工藝參數(shù)。單因素實(shí)驗(yàn)

3、考察了不同脫水方式、底物摩爾比、反應(yīng)溫度、加酶量、反應(yīng)時(shí)間、初始加水量等因素對(duì)辛酸轉(zhuǎn)化率和甘油二酯含量的影響。在此基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)面法優(yōu)化了工藝參數(shù)，建立了產(chǎn)物中辛酸甘油二酯含量的回歸模型方程，獲得的最優(yōu)工藝條件：底物摩爾比1.99:1，反應(yīng)溫度51.5oC，加酶量3.05％，反應(yīng)時(shí)間6.29 h。在此最優(yōu)條件下，實(shí)測(cè)甘油二酯的含量可達(dá)71.9％，與模型預(yù)測(cè)的含量71.3±0.88％非常吻合，證明該模型是合理可靠的。
　　 3．

4、應(yīng)用硅膠柱層析分離純化辛酸甘油二酯的工藝技術(shù)研究。通過(guò)硅膠板薄層層析從六種洗脫劑（氯仿-乙酸已酯、氯仿-甲醇、正己烷-乙酸、石油醚-異丙醇、石油醚-正丁醇、石油醚-無(wú)水乙醚）中初步篩選出石油醚-無(wú)水乙醚體系為最佳流動(dòng)相。
　　 在石油醚-無(wú)水乙醚洗脫體系中，考察了石油醚-無(wú)水乙醚的溶液配比、流速、上樣量對(duì)洗脫效果的影響。結(jié)果表明，當(dāng)上樣量為4 g，流速2.5ml/min，用4.5:1、0.5:1（v/v）石油醚-無(wú)水乙醚溶液進(jìn)行