水體檢測無標(biāo)記生物傳感技術(shù)研究及其檢測體系構(gòu)建.pdf

1、近年來，用于環(huán)境質(zhì)量評估、環(huán)境治理的一種重要方法是對環(huán)境污染物進(jìn)行檢測以及測定，研發(fā)可以對環(huán)境污染物分子進(jìn)行快速、高效檢測的生物傳感器具有廣闊的應(yīng)用價值與前景。本論文成功構(gòu)建了2種新型的生物傳感器分別用于重金屬二價銅離子、卡那霉素兩種環(huán)境污染物的檢測。主要研究內(nèi)容如下:
　　1)、將金納米粒子(AuNPs)與類Fenton試劑相結(jié)合，構(gòu)建了檢測重金屬Cu(Ⅱ)離子的新型傳感方法。單鏈DNA(ssDNA)通過非交聯(lián)聚集方式結(jié)合到金納

2、米顆粒上面，在一定程度上提高AuNPs的穩(wěn)定性，可以降低鹽離子導(dǎo)致的聚集作用;重金屬Cu(Ⅱ)離子可與抗壞血酸鈉發(fā)生類Fenton反應(yīng)生成羥基自由基(·OH)將ssDNA裂解，以此削弱ssDNA對金納米顆粒的保護(hù)，導(dǎo)致金納米顆粒在鹽存在下發(fā)生聚集。不同濃度的Cu(Ⅱ)離子使得金納米顆粒處于不同的聚集狀態(tài)導(dǎo)致其紫外可見吸收值的不同，由此實現(xiàn)了對Cu(Ⅱ)離子的定量檢測。其檢測線性范圍為0.1-10μM，檢出限(3σ)為24nM.該研究方法

3、無需對AuNPs進(jìn)行修飾，通過鹽溶液放大檢測信號，為環(huán)境中Cu(Ⅱ)離子的檢測提供了一種簡單快捷的方法。
　　2)、基于熒光探針Thiazole Orange(TO)能夠從G-四鏈體結(jié)構(gòu)中被置換出來的原理構(gòu)建了檢測卡那霉素的生物傳感器。通過圓二色和非變性PAGE發(fā)現(xiàn)卡那霉素適配體:5'-TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA-3'可以自身形成平行G-四鏈體的結(jié)構(gòu)。TO在溶液中熒光強(qiáng)度很小，嵌入到G-四鏈體中發(fā)出強(qiáng)光