側(cè)鉤木霉Y01的分離、鑒定與固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)孢研究.pdf

1、木霉菌（Trichodermaspp.）是極具生防潛力的真菌之一，能通過競爭、重寄生、產(chǎn)生抗生素、誘導(dǎo)抗性、溶菌、植物促生等多種機制實現(xiàn)對植物病原真菌的拮抗作用，因而被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。側(cè)鉤木霉（Trichodermaghanense）是拮抗木霉的一種，可以有效控制由腐病菌(Pythiumarrhenomanes)引起的水稻枯萎病。然而，目前有關(guān)側(cè)鉤木霉固態(tài)發(fā)酵方面的研究鮮見報道。本研究旨在通過對側(cè)鉤木霉培養(yǎng)基組分和培養(yǎng)工藝條件的優(yōu)化

2、，提高側(cè)鉤木霉的產(chǎn)孢量，以適應(yīng)工業(yè)化生產(chǎn)側(cè)鉤木霉孢子制劑的需求。
　　首先，通過稀釋涂平板的方法從堆肥中分離得到三種形態(tài)不同的木霉菌，經(jīng)過分子生物學(xué)的方法鑒定均為側(cè)鉤木霉（Trichodermaghanense），進而對其形態(tài)特征進行了研究。考察了三株側(cè)鉤木霉對3種常見的植物病原真菌的拮抗作用，其中側(cè)鉤木霉Y01和側(cè)鉤木霉Y02對病原菌拮抗作用明顯。側(cè)鉤木霉Y01生長迅速，產(chǎn)孢豐富，確定其為本研究的出發(fā)菌。
　　然后，在三角

3、瓶中通過單因素篩選、Phckett-Burman實驗、最陡爬坡實驗和響應(yīng)面分析確定適合側(cè)鉤木霉產(chǎn)孢的固態(tài)培養(yǎng)基最優(yōu)配方:固態(tài)基質(zhì)為麩皮、蔗糖0.56％、玉米漿0.56％、硫酸鎂2.59％以及硫酸銨1.50％。確定最佳培養(yǎng)基初始含水量為35％，最佳初始pH值為9。在優(yōu)化后的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基上，該菌孢子產(chǎn)量可達3.75×109CFU/gIDS，約是優(yōu)化前的7.4倍。
　　最后，采用淺盤固態(tài)發(fā)酵對側(cè)鉤木霉進行了擴大培養(yǎng)，研究了淺盤固態(tài)發(fā)酵