新型功能性油脂的生物催化合成，表征與應(yīng)用研究.pdf

1、功能性油脂因為其較高的生物相容性、特殊功能性、“量身定制”的多種應(yīng)用而成為油脂領(lǐng)域研究的重點。本論文主要致力于脂肪酶催化合成新型功能性油脂，研究其物理化學(xué)性質(zhì)，并嘗試開發(fā)不同的用途，實現(xiàn)多種應(yīng)用的功能性油脂。論文內(nèi)容主要包括以下三部分:
　　一、通過酶促酸解反應(yīng)制備1，3-二油酸-2-棕櫚酸甘油三酯(OPO)。首先采用氣象色譜(GC)、高效液相色譜(HPLC)、氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)建立了油脂的脂肪酸組成、分布和甘油三酯組成的檢測

2、方法。其次測定了浙江特色油脂山茶油中脂肪酸組成、分布和甘油三酯組成，并通過皂化反應(yīng)利用山茶油制備高油酸含量（約76％）的混合脂肪酸，利用sn-1，3專一性脂肪酶催化三棕櫚酸甘油酯(PPP)與油酸（?；w）的酸解反應(yīng)制備OPO。以總脂肪酸組成、sn-2位脂肪酸組成和甘油三酯組成為主要指標，系統(tǒng)地優(yōu)化了不同體系下、兩種固定化專一性脂肪酶（Lipozyme TL IM和Lipozyme RM IM）催化合成OPO的反應(yīng)條件，并對兩種脂肪酶的

3、穩(wěn)定性（重復(fù)利用次數(shù)）進行了研究，最后在優(yōu)化的實驗條件下進行了20倍OPO合成放大試驗。
　　二、通過超長鏈脂肪酸和糖醇的酶促合成制備兩親性酯類。首先采用固定化脂肪酶Novozym435催化山崳酸(behenic acid，22∶0)與糖醇（乙二醇，甘油，赤蘚糖醇，季戊四醇，木糖醇，阿拉伯糖醇和山梨糖醇）的酯化反應(yīng)，并優(yōu)化了反應(yīng)條件。其次通過核磁共振(1H NMR)和質(zhì)譜(MS)鑒定合成化合物的分子結(jié)構(gòu)，通過示差掃描量熱法(DSC

4、)對化合物的熱力學(xué)性質(zhì)進行表征，通過變溫傅氏轉(zhuǎn)換紅外線光譜(Temp-Ramp-FT-IR)分析測定化合物的熱致相變。結(jié)果顯示，超長烷烴鏈之間的疏水作用導(dǎo)致合成化合物具有熱穩(wěn)定性，而頭基的大小和體積決定了合成化合物的分子排布;合成化合物具有表面活性，體外酶解試驗顯示出合成化合物具有抗酶解特性。最后系統(tǒng)地構(gòu)建了合成化合物結(jié)構(gòu)-性質(zhì)與功能的關(guān)系，由此得知合成化合物有不同的應(yīng)用潛能。
　　三、山崳酸糖醇單酯在無表面活性劑的藥物載體領(lǐng)域的

5、應(yīng)用研究。首先利用乳化-擴散方法將前述這組合成化合物制備成無表面活性劑的固體脂質(zhì)納米粒(SF-SLN)，并對納米粒的粒徑和表面電勢進行表征，結(jié)果顯示化合物頭基的大小影響納米粒的性質(zhì):頭基較大的化合物制備的納米粒具有較小的粒徑和均一的粒徑分布。之后，采用山崳酸木糖醇單酯和山崳酸山梨糖醇單酯制備的納米粒包裹親脂類模型藥物非諾貝特(FBT)。結(jié)果顯示，包裹10％ FBT的納米粒表現(xiàn)出很強的穩(wěn)定性和長時間藥物緩釋性，多種電子顯微鏡和原子力顯微鏡