甲殼類水產(chǎn)中呋喃西林及氨基脲的研究.pdf

1、本研究建立了甲殼類水產(chǎn)品中氨基脲的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法，探究甲殼類水產(chǎn)品中非呋喃西林源氨基脲的來源，并且嘗試了以呋喃西林的另外一種代謝物5-硝基-2-糠醛或者其苯肼反應(yīng)物5-硝基糠醛-2，4-二硝基苯腙建立新的檢測呋喃西林的方法，主要包括以下幾個方面:
　　1.建立了甲殼類水產(chǎn)品中4種硝基呋喃類化合物殘留量的分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。優(yōu)化了衍生化鹽酸用量，過夜衍生，采用乙酸乙酯進(jìn)行提取，提取后經(jīng)P

2、SA填料固相萃取小柱凈化，然后采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，內(nèi)標(biāo)法定量，內(nèi)標(biāo)添加濃度均為5.00μg/kg，電噴霧正離子源(ESI+)進(jìn)行離子化，采用多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)對硝基呋喃類代謝物各自的母離子及其子離子進(jìn)行監(jiān)測，三重四級桿質(zhì)譜測定。本方法對硝基呋喃類化合物代謝物(AHD，SEM，AMOZ，AOZ)的線性范圍為0.5～20.0 ng/mL;線性相關(guān)系數(shù)R2為:0.9975-0.9994;在0.5、1.0、5.0μg/kg3個添

3、加水平的平均回收率為90.5％～104.5％;相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.56％～8.08％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明建立的固液萃取-超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析方法具有特異性強(qiáng)，樣品前處理簡單等特點(diǎn)，可快速準(zhǔn)確地測定成分復(fù)雜的甲殼類水產(chǎn)品中呋喃西林的殘留量，為甲殼類中氨基脲的檢測提供方法學(xué)方法。
　　2.以12種不同產(chǎn)地的甲殼類水產(chǎn)品（蝦蟹類）為研究對象，測定了其不同組織內(nèi)氨基脲的含量，發(fā)現(xiàn)氨基脲在甲殼類中呈現(xiàn)從肌肉到內(nèi)臟或整體，最后到甲殼濃度不斷增高

4、的趨勢，表明甲殼類水產(chǎn)品中氨基脲的內(nèi)源性存在，并且與外殼有關(guān)。以南美白對蝦、三疣梭子蟹和哈氏仿對蝦為研究對象，研究了水產(chǎn)品加工工業(yè)中手段（加熱、次氯酸消毒處理、裹粉）對甲殼類水產(chǎn)品中氨基脲檢測的影響:不同加熱溫度對肌肉組織中生成氨基脲沒有影響，但是對于殼中氨基脲的生成產(chǎn)生了很大的影響;分別采用不同濃度活性氯的次氯酸鈉處理肌肉組織，并與未處理的作對比檢測其中氨基脲的含量，發(fā)現(xiàn)次氯酸鈉處理下的肌肉組織有氨基脲的檢出，并且在6％活性氯濃度范圍

5、內(nèi)，氨基脲的含量與次氯鈉的濃度呈正比;以含有偶氮二甲酰胺的面粉裹粉處理蝦蟹肌肉組織，發(fā)現(xiàn)同樣有氨基脲的檢出。本部分簡要地討論了各自產(chǎn)生的機(jī)理。
　　3.呋喃西林的檢測方法大部分均以SEM的色譜、光譜進(jìn)行檢測，對于不同來源的SEM則無法鑒定。本研究試圖以呋喃西林的代謝物之一5-硝基-2-糠醛為生物標(biāo)示物，避免非呋喃西林源SEM和呋喃西林代謝產(chǎn)生的SEM在檢測中造成的混淆，從而解決困擾這一領(lǐng)域多年的水產(chǎn)品中呋喃西林濫用產(chǎn)生的SEM假陽

6、性問題。首先嘗試直接建立5-硝基-2-糠醛的高效液相色譜檢測方法:標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.65×104x-1.48×103，相關(guān)系數(shù)R2=0.999745和檢出限為0.1μg/ml，但是由于5-NF的光敏感性，在加標(biāo)回收中，回收率只有20％～40％，無法直接建立對5-硝基-2-糠醛的檢測方法。以5-硝基-2-糠醛的2，4-二硝基苯肼反應(yīng)物5-硝基-2-糠醛-2，4-二硝基苯腙來代替5-NF的檢測。建立了5-硝基-2-糠醛-2，4-二硝基苯腙的液