抗衰老納米載體系統(tǒng)的表征和評價.pdf

1、衰老是每個人都要經(jīng)歷的生命過程。皮膚衰老是機(jī)體整體衰老過程的最早和最直觀地體現(xiàn)。目前，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為過多的氧自由基是導(dǎo)致皮膚老化的主要原因之一。輔酶Q10(CoQ10)和α-硫辛酸(ALA)是兩種重要的抗氧化劑，具有較強(qiáng)的氧自由基清除能力。它們的水溶解性較差、化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定和見光易分解等缺點(diǎn)限制了它們的應(yīng)用范圍。由生理相容性的脂質(zhì)和表面活性劑制備的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(NLC)可以負(fù)載脂溶性的活性成分，改善其水分散性和化學(xué)穩(wěn)定性，而且可以緩

2、慢釋放活性成分，并改善它們的生物利用度。
　　本研究利用高壓均質(zhì)法制備負(fù)載活性成分的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體水分散液。在成功制備CoQ10-NLC和ALA-NLC后，對其進(jìn)行一系列的表征，并分析研究它們的表觀形貌。CoQ10-NLC的平均粒徑為101.6 nm，多分散指數(shù)(PDI)為0.139; ALA-NLC的平均粒徑為155.0 nm，多分散指數(shù)(PDI)為0.161。本研究證實(shí)了制備過程未對納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體負(fù)載的活性成分的化學(xué)性質(zhì)產(chǎn)

3、生影響。另外，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體負(fù)載的活性成分的光穩(wěn)定性得到明顯改善。
　　通過研究負(fù)載活性成分的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體對細(xì)胞活力、細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞核形態(tài)的影響以及利用time-lapse成像實(shí)驗(yàn)等多種途徑證實(shí)了其對HaCaT細(xì)胞沒有明顯的細(xì)胞毒性，表明它們具有較好的細(xì)胞相容性。Time-lapse成像系統(tǒng)實(shí)時、可視化地展示了CoQ10-NLC和ALA-NLC處理的HaCaT細(xì)胞的動態(tài)行為。
　　體外釋放研究發(fā)現(xiàn)，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體負(fù)載

4、的活性成分能夠進(jìn)行緩慢的釋放。通過對NLC體系中活性成分的體外釋放曲線進(jìn)行擬合，并建立數(shù)學(xué)模型來闡釋活性成分的釋放機(jī)制。經(jīng)皮行為實(shí)驗(yàn)證明，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體包裹活性成分后能夠明顯增加活性成分在皮膚內(nèi)的滯留量，而且活性成分沒有透過皮膚，從而避免了可能產(chǎn)生的全身性的不良反應(yīng)。
　　對負(fù)載活性成分的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體進(jìn)行的抗氧化功效研究表明，CoQ10-NLC和ALA-NLC具有對超氧陰離子、羥自由基和DPPH自由基的清除能力。本研究建立了

5、人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT細(xì)胞的氧化損傷模型。利用包括time-lapse成像實(shí)驗(yàn)在內(nèi)的一系列方法，從細(xì)胞內(nèi)活性氧、抗氧化酶體系和脂質(zhì)過氧化等方面研究負(fù)載活性成分的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體對氧化損傷HaCaT細(xì)胞的保護(hù)作用，其保護(hù)機(jī)理主要為CoQ10-NLC和ALA-NLC可以增強(qiáng)氧化損傷細(xì)胞內(nèi)SOD和GSH-PX的活性，減少細(xì)胞內(nèi)MDA的含量，降低ROS水平，減輕活性氧自由基對細(xì)胞的氧化損傷。
　　ALA-NLC能夠抑制B16小鼠黑