人參皂苷對(duì)衰老小鼠皮膚和人角質(zhì)形成細(xì)胞的抗衰老研究.pdf

1、研究目的：觀察人參皂苷在體內(nèi)和體外抗皮膚衰老的作用。在體外實(shí)驗(yàn)中，觀察HaCaT細(xì)胞在不同劑量的中波紫外線(UVB)照射下的存活率、損傷情況，并探討人參皂苷Rg1和Rb1對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)的保護(hù)作用；在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，觀察人參莖葉總皂甙口服對(duì)小鼠皮膚的抗衰老作用。 方法：采用MTT法分析輻射劑量為30,60,90,120mJ/cm2的UVB照射后細(xì)胞存活率的變化，用Hoechst33258核染色法和單個(gè)細(xì)胞凝膠電泳(彗星

2、電泳)技術(shù)觀察細(xì)胞核的損傷情況以及20μg/ml人參皂苷Rg1、Rb1的保護(hù)作用。在體內(nèi)試驗(yàn)中，小鼠被隨機(jī)分為四組：正常對(duì)照組；D-半乳糖衰老模型組；人參莖葉總皂甙低劑量(50mg/kg.d-1)組；人參莖葉總皂甙高劑量(100mg/kg.d-1)組.。連續(xù)42天于小鼠頸背部皮下注射D-半乳糖(1000mg/kg-1)造成衰老模型，同時(shí)，人參皂苷組分別灌胃50mg/kg.d-1和100mg/kg.d-1的人參莖葉總皂甙,42天后，拔眼球

3、取血，48小時(shí)內(nèi)測(cè)定全血中的過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活力；于處死小鼠前兩天用硫化鈉脫去小鼠頸背部的毛，去除皮下脂肪和結(jié)締組織，冰凍保存，測(cè)定皮膚組織勻漿中的超氧化物歧化酶(SOD)活力和羥脯氨酸、丙二醛(MDA)含量。 結(jié)果：隨著UVB照射劑量從30mJ/em2增加到120mJ/cm2，細(xì)胞存活率逐漸減少，細(xì)胞核的損傷逐漸加重；人參皂苷Rg1、Rb1在20μg/ml時(shí)對(duì)UVB照射誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)

4、胞存活率和細(xì)胞損傷有保護(hù)作用。但是在同樣的照射劑量下，20μ.g/ml的Rg1和Rb1的作用不同，Rg120μg/ml使得30,60mJ/cm2UVB輻射劑量下的HaCaT細(xì)胞的存活率明顯升高，使得30mJ/cm2UVB輻射劑量下細(xì)胞彗星電泳的尾長(zhǎng)明顯縮短。Rb120μg/ml可使30,60,90,120mJ/cm2UVB輻射劑量的細(xì)胞存活率均明顯升高，30,60，90mJ/cm2UVB輻射劑量下的細(xì)胞彗星電泳尾長(zhǎng)明顯縮短。100mg/

5、kg.d-1人參莖葉總皂甙使衰老小鼠全血中CAT和GSH-Px活力顯著升高，皮膚組織勻漿中SOD活力顯著升高，MDA含量降低；50mg/kg.d-1人參莖葉總皂甙使衰老小鼠皮膚組織中羥脯氨酸含量升高，與衰老模型組比較有顯著性差異(p＜0.05)，100mg/kg.d-1人參莖葉總皂甙使衰老小鼠皮膚組織中羥脯氨酸含量升高更為顯著(p＜0.01)。 結(jié)論：體外UVB照射抑制HaCaT細(xì)胞的生長(zhǎng)，人參皂苷Rg1、Rb1具有拮抗這種抑制