亞麻籽多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及其免疫調(diào)節(jié)活性和抗乙肝病毒活性分析.pdf

1、亞麻籽多糖類物質(zhì)主要存在于亞麻籽殼中，含量隨產(chǎn)地和品種不同而有所差異。本論文是從亞麻籽殼中分離純化亞麻籽多糖，并對其進行結(jié)構(gòu)鑒定和生物活性評價，主要研究結(jié)果如下：
　　以粉碎的亞麻籽為原料，采用甘油:乙醇體積比為15:4的混合溶液分離得到亞麻籽殼。再以亞麻籽殼為原料，經(jīng)“水提醇沉法-Sevage法脫蛋白”得到亞麻籽粗多糖，得率為4.62％；再經(jīng)“DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換柱層析和Sephadex G-

2、100葡聚糖凝膠柱層析”制備出亞麻籽中性多糖FP-1與酸性多糖FP-2，所得兩組分分子量分別為2626 kDa和1182 kDa，F(xiàn)P-1和FP-2具有良好的熱穩(wěn)定性，在230℃以下熱穩(wěn)定性都很好。
　　元素分析結(jié)果表明FP-2與FP-1相比，與蛋白結(jié)合更為緊密，并且FP-2和FP-1含有一定的硫元素；IR分析表明FP-1和FP-2都具有多糖的特征吸收峰；剛果紅實驗結(jié)果表明FP-1與FP-2都有三螺旋高級結(jié)構(gòu)，推測兩者具有較好的生

3、物活性。GC結(jié)果表明FP-1是由3.81%的L-鼠李糖、10.62%的L-阿拉伯糖、3.99%的L-巖藻糖、35.24%的D-木糖、0.2%的D-甘露糖、2.66%的D-葡萄糖和23.39%的D-半乳糖組成；FP-2是由11.27%的L-鼠李糖、4.03%的L-阿拉伯糖、2.82%的L-巖藻糖、7.12%的D-木糖、55.75%的D-半乳糖醛酸、2.99%的D-甘露糖、4.41%的D-葡萄糖、11.61%的D-半乳糖組成。
　　高

4、碘酸氧化和Smith降解產(chǎn)物分析顯示，F(xiàn)P-1有36.0%的1→、1→6糖苷鍵；47.5%的1→2或者1→4糖苷鍵；16.5%的1→3糖苷鍵連接。FP-2有27.2%的1→、1→6連接糖苷鍵；33.4%的1→2或者1→4糖苷鍵；39.4%的1→3連接糖苷鍵。甲基化分析結(jié)果表明FP-1主要是由→4)-Xyl-(1→、→2,3,4)-Xyl-(1→、Xyl-(1→和→3)Ara-(1→組成。FP-2主要是由→4)-Galp-(1→、→2,4

5、)-Galp-(1→、→2)-Rhap-(1→和Glup-(1→組成。結(jié)合前面的化學(xué)分析法,核磁共振分析顯示FP-1多糖主要是以1→4連接的D-木糖為主鏈，同時含有1→2,3,4，和1→連接糖苷鍵的木糖和較多1→3和1→連接的阿拉伯糖。FP-2多糖是以1→4連接的半乳糖為主鏈，同時含有1→2糖苷鍵的半乳糖，1→2糖苷鍵連接的鼠李糖。
　　亞麻籽多糖FP-1能顯著提高小鼠巨噬細胞Raw264.7分泌TNF-a、IL-6、IL-12及

6、NO的能力，同時能明顯夠降低HBsAg、HBeAg的表達和抑制乙肝病毒DNA的復(fù)制，說明FP-1具有顯著的抗病毒活性和免疫調(diào)節(jié)功能。亞麻籽多糖FP-2對M1型和M2型巨噬細胞極化試驗結(jié)果顯示，巨噬細胞分別經(jīng)LPS和IL-4刺激后，M1/M2平衡打破，開始向M1或者M2方向發(fā)展，中高劑量的FP-2組一定程度上既促進了諸多炎癥因子IL-6、TNF-α和iNOS mRNA的分泌，又增加了抗炎因子IL-10和TGF-β的分泌，表明FP-2具有雙