熒光法研究胭脂紅、檸檬黃及日落黃與BSA相互作用機(jī)理.pdf

1、食用合成色素被人體大量吸收后，可以轉(zhuǎn)化成致癌物質(zhì)，對(duì)人體造成不同程度的損害。近年來(lái)，全國(guó)范圍內(nèi)食用合成色素類事件層出不窮，如蘇丹紅事件，紅心蛋事件，染色饅頭事件等。雖然，我國(guó)目前已對(duì)食用合成色素的種類、數(shù)量做出了明確的規(guī)定，但是這些數(shù)據(jù)的獲得多半是參考國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)而來(lái)。為此，本文以檸檬黃、日落黃、胭脂紅為研究對(duì)象，對(duì)三種物質(zhì)與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用機(jī)理進(jìn)行了探索，目的是建立一種檢測(cè)食用合成色素的新方法。
　　本文采用紫外-可

2、見(jiàn)光吸收光譜法、熒光發(fā)射光譜法研究了BSA與檸檬黃、日落黃、胭脂紅之間的相互作用機(jī)理，考察了緩沖溶液種類、pH、溫度、反應(yīng)時(shí)間四個(gè)條件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。用單因素試驗(yàn)，確定了反應(yīng)的最佳條件為:pH值為7.4的Tris-HCl作緩沖溶液，室溫條件下反應(yīng)15min。在該條件下用紫外-可見(jiàn)光吸收光譜法確定了BSA、檸檬黃、日落黃、胭脂紅的最佳吸收波長(zhǎng)分別是283nm，480nm，425nm，507nm;用熒光發(fā)射光譜法確定了BSA的最佳發(fā)射波長(zhǎng)

3、是340nm，激發(fā)、發(fā)射光狹縫寬度均為5nm。用Stern-Volmer方程處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得到298K時(shí)的動(dòng)態(tài)猝滅常數(shù)(KSV)分別為3.8×106L·mol-1、7.1×106L·mol-1和4.7×105L·mol-1;用Lineweaver-Burk雙倒數(shù)函數(shù)方程處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，得到298K時(shí)靜態(tài)猝滅常數(shù)(KLB)分別為6.6×105L·mol-1，4.9×105L·mol-1，1.9×105L·mol-1;用lg[(F0-F)/F

4、]=lgK0+ nlgCQ處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，得到結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n)分別為0.7605，0.6117，0.4716;運(yùn)用F(o)ster非輻射能量轉(zhuǎn)移原理，計(jì)算出了檸檬黃、日落黃、胭脂紅與BSA殘基之間的距離為分別為5.36nm，6.32nm，3.12nm，非輻射能量轉(zhuǎn)移效率分別為78％，62％，41％?；谝陨涎芯拷Y(jié)果，建立了檢測(cè)樣品中三種食用合成色素的新方法——熒光猝滅法。該方法靈敏度高(檢出限0.02μg/mL)，線性范圍廣(0.1-8.