葉酸殼聚糖修飾姜黃素納米脂質(zhì)體的制備及性質(zhì)表征.pdf

1、納米脂質(zhì)體因獨(dú)具特性被作為載體而廣受關(guān)注與研究。但因其磷脂易被氧化、易融合聚集等不穩(wěn)定因素使得藥物容易泄露，同時(shí)脂質(zhì)體本身缺乏主動(dòng)靶向性，從而使得它的使用受到限制。從姜黃中提取出來(lái)的姜黃素具有廣譜生理活性，但因水溶性差、對(duì)光及熱等不利的環(huán)境極為敏感，它的生物利用率并不高。研究表明，采用脂質(zhì)體技術(shù)將姜黃素包載起來(lái)，可以在很大程度上提高姜黃素的生物利用率。為了進(jìn)一步提高姜黃素脂質(zhì)體的物理穩(wěn)定性，緩釋性，細(xì)胞攝取率，本實(shí)驗(yàn)將葉酸與殼聚糖偶合，

2、葉酸-殼聚糖通過(guò)靜電相互作用力包覆在姜黃素脂質(zhì)體表面，從而形成葉酸-殼聚糖姜黃素納米脂質(zhì)體。隨后考察修飾前后兩種脂質(zhì)體的儲(chǔ)存穩(wěn)定性、緩釋性及結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)兩者的攝取。
　　本文以1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳乙二胺鹽酸鹽(EDC)與N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)為催化劑，反應(yīng)合成葉酸-殼聚糖復(fù)合物。之后采用紅外光譜法檢測(cè)反應(yīng)產(chǎn)物的官能團(tuán)。結(jié)果顯示，葉酸殼聚糖在1656cm-1及1606cm-1處出現(xiàn)了吸收峰，它們分別代表殼聚糖與

3、葉酸的特征峰，這表明葉酸與殼聚糖偶聯(lián)成功。通過(guò)薄膜分散法結(jié)合動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備的姜黃素納米脂質(zhì)體，脂質(zhì)體粒徑為67.4±3.4nm，電位為-13.81±2.75mv，而脂質(zhì)體經(jīng)葉酸殼聚糖修飾后，粒徑變?yōu)?03.6±4.1nm，電位變?yōu)?6.35±3.54mv。在體外釋放實(shí)驗(yàn)中，弱堿性的條件下，葉酸-殼聚糖修飾后的脂質(zhì)體顯示出更佳的緩釋性（24h釋藥17.7％）。在25℃的條件下儲(chǔ)存4周后，兩種脂質(zhì)體的粒徑及電位的變化較小，但修飾后的脂

4、質(zhì)體顯示出更好的藥物保護(hù)性。
　　同時(shí)，考察姜黃素脂質(zhì)體與葉酸-殼聚糖修飾姜黃素脂質(zhì)體與結(jié)腸癌細(xì)胞的親和性。MTT比色法結(jié)果顯示，細(xì)胞毒性隨藥物濃度升高而增大，在藥物濃度為80μg/mL時(shí)，葉酸-殼聚糖姜黃素脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞存活率僅為26%，而姜黃素脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞存活率為38%。隨著藥物濃度的增加，兩者間的毒性差距加大。倒置顯微鏡觀察不同藥物濃度作用下的細(xì)胞形態(tài)，隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞碎片增多，細(xì)胞形態(tài)無(wú)規(guī)則。利用姜黃素本