丹參復方多糖顆粒劑與松塔色素的制備及其抗氧化活性研究.pdf

1、本課題對丹參復方多糖的體外抗氧化活性以及其制劑、分析方法等進行了系列研究工作，對來自廢棄資源的紅松松塔的色素提取物的抗氧化活性也進行了研究，主要內(nèi)容如下:
　　1、對丹參復方總多糖的抗氧化活性進行研究，并對其脫蛋白脫色純化前后的活性進行對照測定。
　　采用水提醇沉法制備丹參復方總多糖，并對得到的總多糖進行脫蛋白、脫色等不同方法的純化，測定各多糖產(chǎn)物清除羥基自由基、DPPH·自由基及超氧陰離子自由基的能力。由實驗結(jié)果可知，丹參

2、復方總多糖樣品呈現(xiàn)明顯的體外抗氧化活性，多糖活性隨其濃度增大而增強;總多糖經(jīng)脫蛋白、脫色等純化步驟后體外抗氧化活性增強，純化后的丹參復方總多糖仍然呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系。體內(nèi)脂質(zhì)過氧化是諸多疾病的常見原因之一，天然成分的抗氧化活性常與抗腫瘤活性有一定關(guān)聯(lián)，并與許多疾病的防治相關(guān)，丹參復方多糖的抗氧化活性值得繼續(xù)深入研究和開發(fā)利用。
　　2、建立了丹參復方多糖顆粒劑中多糖含量測定的新方法——淀粉酶法聯(lián)合DNS法進行測定，有效克服了輔料淀

3、粉干擾有效成分多糖含量測定這一技術(shù)難點，文獻中尚未見有同類工作報道。
　　在應(yīng)用DNS法（3，5-二硝基水楊酸法）對丹參復方多糖顆粒劑中有效成分多糖進行含量測定時曾發(fā)現(xiàn)，因輔料淀粉也為多糖成分對含量測定形成干擾，導致DNS法不能測得有效成分多糖含量，只能獲知有效成分多糖和輔料淀粉含量之和，文獻中未見相應(yīng)解決辦法。本實驗巾嘗試了下述思路:首先采用淀粉酶法除去顆粒劑中的輔料淀粉，將淀粉酶解為小分子雙糖后，再利用它和多糖的醇溶性不同，以

4、醇沉法分離出丹參復方多糖，此后即可使用DNS法對該多糖進行含量測定，避免輔料淀粉的干擾;由實驗結(jié)果可知，所建立的淀粉酶法和DNS法聯(lián)合測定丹參復方多糖顆粒劑多糖含量的方法，成功克服了輔料淀粉的干擾，方法學考察各項指標均符合規(guī)定，該方法可用于丹參復方多糖顆粒劑的多糖含量測定，對于含有輔料淀粉的其它中藥制劑的多糖含量測定也可提供參考。
　　3、在活性研究基礎(chǔ)上，又進一步研究了丹參復方多糖顆粒劑的制劑工藝及質(zhì)量檢查。在制劑工藝研究中，通

5、過比較試驗，分別對顆粒劑的吸濕性、流動性及成型性等指標進行了考察，優(yōu)選出顆粒劑的輔料種類及原料和輔料的配比。以含水乙醇為潤濕劑進行制粒，干燥，整粒，即得丹參復方多糖顆粒劑。該實驗結(jié)果可為丹參復方多糖制劑的后續(xù)研發(fā)提供參考。
　　4、除上述丹參復方多糖系列研究之外，還對廢棄資源松塔的色素提取物的初步分離和體外抗氧化活性進行研究，測定各色素產(chǎn)物的還原能力、清除·OH自由基、O2-·自由基能力。實驗結(jié)果表明，色素粗提物和經(jīng)陰離子交換樹脂

6、純化得到的NaCl洗脫物均有明顯的體外抗氧化活性。該NaCl洗脫物再經(jīng)pH梯度萃取所得各組分也進行抗氧化活性測定，其中5％NaHCO3和5％Na2CO3萃取組分活性較強，5％NaOH萃取組分活性低于上述兩萃取物。已知5％NaHCO3、5％Na2CO3萃取物的酸性高于5％NaOH萃取物的酸性，因而該實驗中酸性較強的組分抗氧化活性也較強。
　　離子交換樹脂純化所得鹽酸-乙醇不同洗脫物的抗氧化活性實驗結(jié)果表明，兩種后被洗脫的組分3號和2

7、號活性相近，最先洗脫的1號洗脫物活性低于上述兩組分。即該實驗中對陰離子樹脂吸附強的組分，抗氧化活性也相對較強。
　　由上述可知，本課題中研究確認了丹參復方多糖的體外抗氧化活性，經(jīng)脫蛋白脫色純化后其活性明顯增強，研究了丹參復方多糖顆粒劑的制備，成功建立了丹參復方多糖顆粒劑中有效成分多糖含量測定的方法，有效克服了輔料淀粉干擾含量測定的技術(shù)難點，為丹參復方多糖的開發(fā)應(yīng)用提供了活性、制劑、分析方法等系列參考數(shù)據(jù)，此外，還對松塔色素提取物進