δ-氨基酮戊酸脫水酶性質(zhì)及其與大蒜綠變的關(guān)系.pdf

1、大蒜（Allium Sativum L.）為單子葉植物蔥科蔥屬植物蒜的鱗莖，屬多年生草本植物，為香辛類(lèi)蔬菜。因其含有非常豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)而具有很多生理功能，被譽(yù)為“天然保健品”。我國(guó)是世界上最大的大蒜生產(chǎn)國(guó)，但在加工過(guò)程中常出現(xiàn)綠變現(xiàn)象，嚴(yán)重的影響了產(chǎn)品的外觀質(zhì)量，妨礙了大蒜的進(jìn)一步深加工和高附加值市場(chǎng)的開(kāi)拓，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。δ-氨基酮戊酸脫水酶(ALAD)能夠催化兩分子的ALA生成一個(gè)單吡咯分子化合物PBG，它是各種吡咯化合物的前

2、體。由于大蒜綠色素的分子結(jié)構(gòu)中含有吡咯環(huán)結(jié)構(gòu)，因此，ALAD作為ALA代謝途徑的唯一下游酶，對(duì)大蒜綠色素的生成起著關(guān)鍵作用。本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定不同貯藏溫度下ALAD的活性及大蒜綠變強(qiáng)度的變化，研究ALAD與大蒜綠變的關(guān)系;通過(guò)對(duì)ALAD進(jìn)行分離純化，研究ALAD的酶學(xué)性質(zhì)及動(dòng)力學(xué)特性，掌握控制ALAD活性與大蒜綠變的方法，確定ALAD在大蒜綠變途徑中的作用，對(duì)揭示大蒜綠變機(jī)理，有效控制綠變現(xiàn)象，促進(jìn)大蒜產(chǎn)業(yè)深遠(yuǎn)發(fā)展具有重要的意義。主要研究結(jié)

3、果如下:
　　1、在相同的貯藏期內(nèi)(0～180d)，4℃貯藏大蒜的綠變強(qiáng)度和ALAD的酶活性均大于室溫貯藏的大蒜，且綠變強(qiáng)度和ALAD的酶活性變化趨勢(shì)一致。說(shuō)明低溫貯藏可促進(jìn)綠變的發(fā)生且ALAD的酶活性與大蒜綠變密切相關(guān)。
　　2、本試驗(yàn)采用硫酸銨分級(jí)沉淀法、DEAE-SepharoseCL-6B離子交換層析、SephadexG-200凝膠層析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水層析純化出較高純度的ALAD，純

4、化倍數(shù)為14.7，產(chǎn)率為20.9％。通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，大蒜中ALAD的單亞基分子量為55.01KDa。
　　3、ALAD酶學(xué)性質(zhì)研究表明，ALAD的最適pH為8.5，最適溫度為37℃。金屬離子Li+、Na+、K+、Ca+、Mg2+、Zn2+、Mn2+能夠促進(jìn)ALAD的酶活性，而金屬離子Cu2+、Fe3+、Al3+能夠抑制ALAD的酶活性，金屬離子Ba+對(duì)酶活性沒(méi)有明顯的影響。D-葡萄糖和D-果糖對(duì)ALAD存在抑制