豬皮明膠酶解制劑對(duì)骨密度影響的研究.pdf

1、我國(guó)豬皮明膠資源非常豐富，明膠由18種氨基酸組成，由于其不含脂肪及膽固醇，且具有多樣保健功能，越來(lái)越多地受到各學(xué)科的關(guān)注。我國(guó)居民膳食中鈣攝入量整體不足，將嚴(yán)重影響國(guó)民體質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)旨在對(duì)豬皮明膠水解工藝及豬皮膠原多肽與鈣的螯合工藝進(jìn)行探究，制備一種補(bǔ)鈣效果好、且可促進(jìn)骨膠原形成的膠原多肽補(bǔ)鈣劑。
　　采用豬皮明膠為原料，選用五種蛋白酶于各酶的最適條件下水解豬皮明膠，并以酶解產(chǎn)物中羥脯氨酸的生成量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。通過(guò)試驗(yàn)研究得知，水解

2、液中羥脯氨酸含量最高的為SG蛋白酶，GW蛋白酶次之，然后依次是中性蛋白酶、堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶。因此，選取SG蛋白酶進(jìn)行隨后的試驗(yàn)。以水解后羥脯氨酸含量為指標(biāo)，采用SG蛋白酶進(jìn)行單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)。結(jié)果表明：在酶添加量為0.05g/g、水解溫度45℃、水解時(shí)間4.5h、pH值為3.0的條件下，所得羥脯氨酸含量最高。
　　以豬皮明膠酶解所得豬皮膠原多肽和葡萄糖酸鈣為原料，膠原多肽與鈣的螯合率為指標(biāo)，在一定條件下制備多肽螯合鈣。通

3、過(guò)Plackett-Buiman(PB)和中心組合試驗(yàn)，考察豬皮膠原多肽/水的料液比、膠原多肽/葡萄糖酸鈣的質(zhì)量比、pH、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、攪拌速度、攪拌時(shí)間等因素對(duì)豬皮膠原多肽螯合率的影響。試驗(yàn)確定最佳螯合條件為：膠原多肽/水料液比1.5:100，反應(yīng)溫度60℃，攪拌速度30r/min，攪拌時(shí)間20min，膠原多肽/葡萄糖酸鈣質(zhì)量比5.5:1，pH6.0，反應(yīng)時(shí)間130min，所得膠原多肽與葡萄糖酸鈣的螯合率可達(dá)78.3％。采用 X

4、-射線(xiàn)衍射方法對(duì)豬皮膠原多肽和豬皮膠原多肽螯合鈣進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果表明豬皮膠原多肽與鈣形成了一種新的螯合物。
　　對(duì)實(shí)驗(yàn)室制備的豬皮膠原多肽螯合鈣增加雌性SD大鼠骨密度的效果進(jìn)行研究。將斷乳雌性4周齡SD大鼠隨機(jī)分為7組，喂養(yǎng)低鈣基礎(chǔ)飼料，同時(shí)分別經(jīng)口灌胃蒸餾水、不同劑量膠原多肽螯合鈣和碳酸鈣等受試物。大鼠灌胃第4周做3天鈣代謝試驗(yàn)，從而得出大鼠的鈣表觀吸收率。大鼠飼養(yǎng)過(guò)程中，測(cè)定各組大鼠的體重和身長(zhǎng)，計(jì)算每組大鼠體重和身長(zhǎng)增加率。大

5、鼠灌胃3個(gè)月后處死，剝離大鼠股骨，測(cè)定大鼠股骨的長(zhǎng)度、干重、骨密度和骨鈣含量等指標(biāo)，通過(guò)場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡觀察大鼠股骨表面變化。結(jié)果顯示：20倍劑量多肽螯合鈣組大鼠的體重增加率、身長(zhǎng)增加率、股骨質(zhì)量、骨鈣含量和骨密度都顯著高于大鼠低鈣對(duì)照組；10倍劑量多肽螯合鈣組大鼠體重增加率和骨密度顯著高于大鼠低鈣對(duì)照組。20倍劑量多肽螯合鈣組大鼠體重增加率、股骨質(zhì)量、骨密度和骨鈣含量都顯著高于大鼠相應(yīng)劑量碳酸鈣組；10倍劑量多肽螯合鈣組大鼠體重增加率和