基于分子信標(biāo)的光致電化學(xué)生物傳感方法研究.pdf

1、目前，分析科學(xué)工作者為了適應(yīng)生命科學(xué)的發(fā)展要求，已經(jīng)建立了一系列光學(xué)或者電化學(xué)檢測(cè)DNA的方法。本論文將分子信標(biāo)與光敏反應(yīng)、電化學(xué)反應(yīng)相結(jié)合，提出了一種新的光致電化學(xué)生物傳感新方法；研究了電沉積法固定電化學(xué)發(fā)光試劑Ru(bpy)32+于電極表面的可行性和利用該電極制備電化學(xué)發(fā)光傳感器的可行性。
　　全文共分四章，主要內(nèi)容如下：
　?。?）緒論部分，對(duì)DNA的結(jié)構(gòu)及常見的檢測(cè)方法，分子信標(biāo)的含義及檢測(cè)原理進(jìn)行了闡述，介紹了電化

2、學(xué)發(fā)光原理及其應(yīng)用，Ru(bpy)32+電化學(xué)發(fā)光原理。
　?。?）首先對(duì)基于分子信標(biāo)的光致電化學(xué)新型DNA傳感器中所必須的單線態(tài)氧電化學(xué)捕獲探針進(jìn)行了選擇研究。研究了一系列活性氧清除劑（蘆丁、多巴胺、腎上腺素、異煙肼、抗壞血酸等）捕獲亞甲基藍(lán)光敏產(chǎn)生的單線態(tài)氧前后電化學(xué)性質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)蘆丁和多巴胺可以與光敏產(chǎn)生的單線態(tài)氧反應(yīng)，且在反應(yīng)之后蘆丁和多巴胺的電化學(xué)氧化還原峰電流有明顯的降低。本章中對(duì)光敏反應(yīng)中產(chǎn)生的活性氧的種類進(jìn)行了判

3、定；對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明當(dāng)磷酸緩沖溶液的pH=7，蘆丁濃度為1×10-5 mol/L，亞甲基藍(lán)濃度為1×10-6 mol/L時(shí)，蘆丁捕獲單線態(tài)氧的效果最佳。
　?。?）構(gòu)建了一種基于熒光分子標(biāo)記的分子信標(biāo)光致電化學(xué)新型DNA傳感器。此方法中首先將亞甲基藍(lán)標(biāo)記的分子信標(biāo)探針和多巴胺同時(shí)固定在金電極表面修飾的金納米粒子上；與目標(biāo)DNA結(jié)合前，分子信標(biāo)上的亞甲基藍(lán)的熒光被金納米粒子猝滅；與目標(biāo)DNA結(jié)合后，分子信標(biāo)打開，亞甲基

4、藍(lán)熒光恢復(fù)，在光照作用下與溶解氧分子作用產(chǎn)生單線態(tài)氧，單線態(tài)氧與多巴胺反應(yīng)；以多巴胺的電化學(xué)響應(yīng)信號(hào)傳感分子信標(biāo)探針構(gòu)象變化，從而對(duì)溶液中的目標(biāo)DNA進(jìn)行檢測(cè)。此方法成功用于花椰菜花葉病毒的基因組DNA的檢測(cè)中。此外我們還對(duì)該傳感器的特異性進(jìn)行了檢測(cè)。
　?。?）介紹了一種操作簡(jiǎn)便、容易控制的制備二氧化硅復(fù)合膜的方法，及其在電化學(xué)發(fā)光傳感器中的應(yīng)用。采用電沉積的方法制備了殼聚糖-金納米粒子-Ru(bpy)32+-二氧化硅復(fù)合膜，采