基于低溫微環(huán)境的肺癌發(fā)生與川烏治療研究.pdf

1、肺癌居全國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率首位，其增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等都與腫瘤微環(huán)境有密切關(guān)系。低氧、低pH以及微循環(huán)障礙是腫瘤微環(huán)境的特征，其結(jié)果集中于一個(gè)現(xiàn)象-腫瘤局部環(huán)境低溫。然而，至今為止這個(gè)現(xiàn)象未引起腫瘤研究者們的注意，以此為突破口研究低溫微環(huán)境在腫瘤發(fā)生中的作用，很可能為腫瘤防治打開一條新途徑。本課題研究目的是探索低溫微環(huán)境對(duì)肺癌的促進(jìn)作用，觀察川烏干預(yù)低溫微環(huán)境后對(duì)肺癌是否有防治效應(yīng)。
　　本課題體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法檢測(cè)不同溫度

2、體外對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖率的影響，觀察不同濃度川烏水煎液對(duì)Lewis肺癌細(xì)胞增殖的抑制作用及癌細(xì)胞遷移能力的影響。在體內(nèi)研究中，采用Lewis肺癌皮下移植性模型，考察環(huán)境低溫和藥物低溫對(duì)荷瘤小鼠體征及腫瘤生長(zhǎng)的影響，同時(shí)觀察川烏水煎液對(duì)荷瘤小鼠各項(xiàng)生理指標(biāo)及腫瘤生長(zhǎng)的影響，結(jié)合相伴免疫反應(yīng)研究川烏水煎液對(duì)Lewis肺癌荷瘤小鼠各項(xiàng)生理指標(biāo)的變化及對(duì)宿主腫瘤免疫反應(yīng)的影響；采用烏拉坦誘導(dǎo)的肺癌模型，觀察小鼠血流灌注量、耳部靜脈直徑及其肺部組織

3、病理變化，考察肺癌發(fā)生中腫瘤形成與低溫微環(huán)境的關(guān)系，同時(shí)觀察川烏水煎液對(duì)低溫微環(huán)境和腫瘤發(fā)生的影響。進(jìn)一步，采用免疫組化、免疫蛋白印跡等方法觀察烏拉坦誘導(dǎo)肺癌模型中LC3及Nanog的表達(dá)量，同時(shí)運(yùn)用透射電鏡觀察肺細(xì)胞內(nèi)線粒體形態(tài)，探索低溫微環(huán)境對(duì)肺癌的促進(jìn)機(jī)制。
　　體外實(shí)驗(yàn)顯示低溫微環(huán)境顯著降低脾淋巴細(xì)胞增殖能力，川烏水煎液呈劑量相關(guān)性降低Lewis肺癌細(xì)胞的增殖率和遷移能力。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示低溫微環(huán)境降低血清中CEA、AFP含量

4、，升高 APT含量；川烏水煎液可以提高荷瘤小鼠的宿主抗移植物相伴免疫反應(yīng)能力，改善其生存狀態(tài)，顯著降低血清中CEA、AFP和APT含量，抑制腫瘤生長(zhǎng)。烏拉坦誘導(dǎo)肺癌模型中，隨著誘癌進(jìn)展，小鼠出現(xiàn)肺部、耳部、足部血流灌注量減少的寒像；與模型組相比，川烏水煎液顯著升高肺部、耳部、足部血流灌注量，緩解微循環(huán)障礙，減緩了寒凝血瘀體征，減少肺部結(jié)節(jié)數(shù)，抑制了腫瘤進(jìn)程。HE染色結(jié)果顯示川烏水煎液可以改善肺泡壁的增厚。在免疫組化中，川烏水煎液組 LC