河北葎草藥材的質(zhì)量研究.pdf

1、葎草為?？浦参锶劜?Humulus scandens（Lour.）Merr.的干燥地上部分，具有清熱解毒，利尿通淋的功效，用于肺熱咳嗽，發(fā)熱煩渴，骨蒸潮熱，熱淋澀痛，濕熱瀉痢，熱毒瘡瘍，皮膚瘙癢，有較高的藥用價(jià)值。葎草資源豐富，我國(guó)除新疆、青海外，南北各省區(qū)均有分布?，F(xiàn)已收載于四川、河南、上海、福建等地方中藥材標(biāo)準(zhǔn)，河北省藥材地方標(biāo)準(zhǔn)中尚未收載。葎草產(chǎn)地分布較廣，不同產(chǎn)地間藥材質(zhì)量差異性較大，已有研究表明北京及河北產(chǎn)葎草中芹菜素-7-O

2、-β-D-葡萄糖苷、木犀草素含量較高，但尚未有人對(duì)河北產(chǎn)葎草藥材質(zhì)量進(jìn)行系統(tǒng)研究。為此，本文開展了河北產(chǎn)葎草藥材質(zhì)量的相關(guān)研究。
　　第一部分、河北葎草藥材的顯微和薄層色譜鑒別研究及水分、灰分測(cè)定
　　目的：確定河北產(chǎn)葎草的顯微鑒別特征和薄層色譜鑒別方法，并測(cè)定水分、總灰分、酸不溶性灰分含量。
　　方法：通過對(duì)樣品處理方法、展開系統(tǒng)、薄層板及堿度、展開溫度等實(shí)驗(yàn)條件考察，以木犀草素為對(duì)照，建立河北產(chǎn)葎草藥材薄層色譜鑒別

3、方法；顯微鑒別和水分、總灰分及酸不溶性灰分測(cè)定按《中國(guó)藥典》2010版（一部）附錄項(xiàng)下規(guī)定方法進(jìn)行。
　　結(jié)果：河北產(chǎn)葎草藥材粉末顯微鑒別，可見纖維、晶細(xì)胞、非腺毛、螺紋導(dǎo)管、具緣紋孔導(dǎo)管、葉下表皮細(xì)胞、草酸鈣簇晶和氣孔，具有特征性。薄層色譜條件，薄層板：硅膠G堿性預(yù)制板（堿性0.4％）；展開劑：甲苯-甲酸乙酯-甲酸（5:4:1），常溫下展開。所有樣品在與木犀草素對(duì)照品相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色熒光斑點(diǎn)。河北產(chǎn)葎草藥材中水分含量在

4、8.4%～10.0%范圍內(nèi)，平均值為9.4%；總灰分含量在11.8%～15.7%范圍內(nèi)，平均值為13.4%；酸不溶性灰分含量在0.4%～2.3%范圍內(nèi)，平均值為1.1%。
　　結(jié)論：纖維、晶細(xì)胞、非腺毛、螺紋導(dǎo)管、具緣紋孔導(dǎo)管、草酸鈣簇晶、葉下表皮細(xì)胞和氣孔可用于河北產(chǎn)葎草藥材粉末顯微特征鑒定。確立的薄層色譜鑒別方法，分離效果好，Rf值適中，色譜斑點(diǎn)清晰，且有較好的適應(yīng)性和重現(xiàn)性，可用于葎草藥材的鑒別。水分、總灰分及酸不溶性灰分含

5、量均低于《中國(guó)藥典》2010版（一部）同類藥材限度值。
　　第二部分、河北葎草藥材中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的含量測(cè)定研究
　　目的：建立河北產(chǎn)葎草藥材中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素3種成分的含量測(cè)定方法，比較河北不同產(chǎn)地、不同月份、雌株、雄株葎草中上述3種成分的含量。
　　方法：高效液相色譜（HPLC）法同時(shí)測(cè)定葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀

6、草素3種成分的含量。通過對(duì)供試品溶液制備方法、檢測(cè)波長(zhǎng)、流動(dòng)相、色譜柱的優(yōu)選，對(duì)方法的精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、加樣回收率的考察，建立檢測(cè)方法。以建立的含量測(cè)定方法對(duì)不同樣品進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：系統(tǒng)適用性條件，色譜柱：Agilent5 TC-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脫；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：340nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL。供試品制備方法：取過3號(hào)篩

7、的藥材粉末2g，70%甲醇30mL，加熱回流提取1h，提取1次。
　　河北不同產(chǎn)地葎草藥材，按地理分布由南向北，木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的含量大體呈上升的趨勢(shì)，3種成分的含量分別在0.0053%～0.2332%、0.0008%～0.0521%、0.0002%～0.0018%范圍內(nèi)。按不同采收期檢測(cè)，邢臺(tái)、石家莊、廊坊、唐山、承德產(chǎn)葎草藥材中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量以7、8月份為高

8、；木犀草素的含量，邢臺(tái)、唐山產(chǎn)葎草藥材以7月份含量為高，石家莊、廊坊、承德產(chǎn)葎草藥材以9月份含量為高。按雌、雄植株檢測(cè)，邯鄲、邢臺(tái)、廊坊、唐山、承德的雌株葎草中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素的含量均比雄株中的含量高，木犀草苷平均含量雌株約是雄株的3倍，芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和木犀草素平均含量雌株約是雄株的2倍。
　　結(jié)論：建立了 HPLC法同時(shí)測(cè)定葎草藥材中木犀草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷

9、、木犀草素的含量，該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。河北不同產(chǎn)地、不同月份、雌株和雄株葎草中3種成分的含量差別較大。
　　第三部分、河北產(chǎn)葎草藥材HPLC特征圖譜研究
　　目的：建立河北產(chǎn)葎草藥材HPLC特征圖譜。
　　方法：HPLC法。通過對(duì)河北不同產(chǎn)地葎草藥材色譜圖的測(cè)定，確定共有吸收峰，利用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004版）》，擬合河北產(chǎn)葎草藥材的特征圖譜，并對(duì)不同產(chǎn)地樣品色譜圖與特征圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)。<