2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)中葡萄糖攝取和代謝的異常增加能導(dǎo)致動脈粥樣硬化等多種血管疾病,已有研究表明PDGF-BB通過誘導(dǎo)葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)的膜轉(zhuǎn)位,促進葡萄糖的攝取和代謝。去乙?;窼IRT1能影響胰腺β細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和肝細(xì)胞等葡萄糖的攝取和代謝,而在VSMCs中SIRT1與葡萄糖攝取和代謝的關(guān)系尚不清楚,本實驗利用SIRT1的激動劑和抑制劑分別處理VSMCs,以探討SIRT1與葡萄糖攝取及代謝的相關(guān)性。
 

2、 方法與結(jié)果:
  1、PDGF-BB刺激VSMCs的GLUT4膜轉(zhuǎn)位
  PDGF-BB(20 ng/mL)刺激VSMCs0、5、15、30 min后,用Westernblotting及細(xì)胞免疫熒光染色檢測GLUT4的亞細(xì)胞分布。結(jié)果顯示,與對照組相比,在PDGF-BB刺激的VSMCs中,GLUT4膜轉(zhuǎn)位顯著增強,并在15 min達(dá)到高峰。
  2、SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的GLUT4膜轉(zhuǎn)位

3、>  培養(yǎng)的VSMCs經(jīng)SIRT1的激動劑白藜蘆醇(50μM)和SIRT1抑制劑EX-527(10μM)預(yù)孵育4h后,PDGF-BB(20 ng/mL)刺激15 min。細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示,與對照組相比,白藜蘆醇預(yù)孵育組GLUT4膜轉(zhuǎn)位減弱,而EX-527預(yù)孵育組GLUT4膜轉(zhuǎn)位增強。
  3、PDGF-BB刺激VSMCs葡萄糖攝取
  PDGF-BB(20 ng/mL)和熒光標(biāo)記葡萄糖類似物2-N[7-硝基苯-2-乙二酸

4、,34羥氨基]-2-脫氧葡萄糖(2-NBDG,100μM)共同刺激VSMCs0、5、10、20、30、60 min,流式細(xì)胞術(shù)檢測VSMCs對2-NBDG的攝取。結(jié)果顯示,PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs葡萄糖攝取量呈時間依賴性增強,并在20 min時達(dá)到高峰。
  4、SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs葡萄糖攝取
  培養(yǎng)的VSMCs經(jīng)SIRT1的激動劑白藜蘆醇和SIRT1(50μM)抑制劑 EX-527(10μM

5、)預(yù)孵育4h后,PDGF-BB(20 ng/mL)刺激20 min,用流式細(xì)胞術(shù)檢測VSMCs對2-NBDG攝取。結(jié)果顯示,與對照組相比,白藜蘆醇預(yù)孵育組葡萄糖攝取減弱,而EX-527預(yù)孵育組葡萄糖攝取增強。
  5、PDGF-BB增強VSMCs己糖激酶活性
  PDGF-BB(20 ng/mL)刺激VSMCs0、5、10、15、30、45、60 min后,檢測VSMCs己糖激酶活性。結(jié)果顯示,VSMCs己糖激酶活性與PDG

6、F-BB刺激呈時間依賴性增強,30 min達(dá)到高峰。
  6、SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs己糖激酶活性增強
  培養(yǎng)的VSMCs經(jīng)SIRT1的激動劑白藜蘆醇(50μM)和SIRT1抑制劑EX-527(10μM)預(yù)孵育4h后,PDGF-BB(20 ng/mL)刺激30 min后檢測VSMCs己糖激酶活性,結(jié)果顯示,白藜蘆醇預(yù)孵育組己糖激酶活性減弱,而EX-527預(yù)孵育組己糖激酶活性增強。
  結(jié)論:

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