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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察近β鈦合金 Ti-3Zr-2Sn-3Mo-25Nb(TLM)雙層輝光離子滲氮改性層表面成骨細(xì)胞早期黏附、增殖、堿性磷酸酶活性、成骨相關(guān)基因的表達(dá)情況,研究TLM滲氮改性層對(duì)成骨細(xì)胞早期功能的影響。
方法:
近β鈦合金 TLM圓片試樣經(jīng)拋光、清洗后平均分成兩組,實(shí)驗(yàn)組試樣采用雙層輝光離子滲氮處理,TLM拋光組作為對(duì)照。將小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14接種于兩組試樣表面,掃描電鏡觀察接種4h后細(xì)胞的黏附
2、形貌;MTT法測(cè)3d、5d、7d細(xì)胞增殖情況;檢測(cè)7d、14d細(xì)胞堿性磷酸酶(a lka line p hosp ha tase, ALP)活性;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real time,qRT-PCR)檢測(cè)細(xì)胞Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(Runt-related transcription factor-2,RUNX2)、Ⅰ型膠原α1鏈(typeⅠcollagen alpha1 chain,COLⅠα1)、骨
3、保護(hù)素(osteoprotegerin,OPG)和核因子-κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor- kappaB ligand,RANKL) mRNA的表達(dá)情況。
結(jié)果:
接種4h, TLM滲氮改性組細(xì)胞黏附形態(tài)良好,有細(xì)絲狀偽足伸出,細(xì)胞間連接緊密;培養(yǎng)3d,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞量(0.277±0.007)明顯高于對(duì)照組(0.249±0.004)(P=0.004)而培養(yǎng)
4、5d和7d兩組細(xì)胞量均未見(jiàn)明顯差異;培養(yǎng)14d,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞ALP活性(173.606±1.884)明顯高于對(duì)照組(162.582±2.426)(P=0.003);滲氮組 R UN X2、Ⅰ型膠原α1鏈、骨保護(hù)素 mRN A相對(duì)表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),RANKLmRNA相對(duì)表達(dá)量顯著低于對(duì)照組(P=0.016)。
結(jié)論:
近β鈦合金 TLM表面采用雙層輝光離子滲氮改性后,改性層促進(jìn)成骨細(xì)胞早期黏附,利于
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