應(yīng)用IAAO技術(shù)測(cè)定育肥羔羊小腸可代謝Met和Lys的需要量.pdf

1、本文采用指示氨基酸氧化技術(shù)(IAAOT)以13C-苯丙氨酸（13C-Phe）作為指示劑氨基酸(IAA)，來探討育肥羔羊在正常飼喂條件下對(duì)Met和Lys的需要量，為提高育肥羔羊?qū)θ占Z蛋白質(zhì)的利用效率，提高生產(chǎn)性能水平，提供試驗(yàn)依據(jù)。
　　試驗(yàn)一：為了探討育肥羔羊在飼喂條件下頸靜脈灌注13C-Phe作為IAA進(jìn)行AA代謝動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，呼出氣13CO2中同位素豐度達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)的時(shí)間及平臺(tái)期持續(xù)時(shí)間。選取4只體重32 kg左右哈薩克公羔作

2、為試驗(yàn)動(dòng)物，代謝籠內(nèi)單籠飼養(yǎng)。每天按正常采食量的90％（1200 g）飼喂2次。其中第1-6 d為適應(yīng)期，第7 d為灌注和呼出氣的采樣期。采集灌注過程中至灌注結(jié)束后不同時(shí)間點(diǎn)的呼出氣樣本，測(cè)定13C的千分差值，以確定同位素的穩(wěn)態(tài)。結(jié)果表明，4只試驗(yàn)羊在飼喂條件下以13C-Phe作為IAA進(jìn)行IAAO測(cè)定時(shí)，呼出氣樣品中13C的千分差值在灌注開始1h后迅速升高，平臺(tái)期可維持2 h左右，最終確定的13C-Phe的最佳取樣時(shí)間是在灌注開始后的

3、第1.5-第4 h。本研究的結(jié)果為今后測(cè)定動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)和各種AA的需要量奠定了基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)二：為了探討育肥羔羊Met的需要量，本試驗(yàn)使用IAAOT進(jìn)行評(píng)定。選取3只體重(30.8±0.4 kg)哈薩克公羔，手術(shù)安裝十二指腸瘺管，代謝籠內(nèi)單籠飼養(yǎng)。以13C-Phe作為指示劑。第1-6 d為適應(yīng)期，第7 d進(jìn)行IAAO試驗(yàn)。每只試驗(yàn)羊在進(jìn)行13C-Phe4 h[1.33 mg13C-Phe/(kg-h)]的持續(xù)灌注前，首先通過頸靜

4、脈注射13C-Phe及13C-碳酸氫鈉的啟動(dòng)劑量0.67 mg/kg和0.18 mg/kg。呼出氣樣品在灌注后的90，150和210 min進(jìn)行收集。Met的需要量通過13C-Phe氧化釋放的13CO2氧化率的拐點(diǎn)以及兩線性回歸模型估計(jì)得出。13C-Phe的氧化率隨著Met灌注劑量達(dá)到1.65 g/d而呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì)（P＜0.001）。當(dāng)Met的劑量從1.65 g/d增加到2.15 g/d（P＞0.05）其13C-Phe的氧化率變化不

5、顯著。因此得出Met的補(bǔ)充量為1.28±0.11 g/d。由先前試驗(yàn)得出小腸Met的凈吸收量為0.74 g/d，因此Met的總需要量為2.02 g/d。
　　試驗(yàn)三：本試驗(yàn)的目的是通過使用IAAOT進(jìn)行育肥羔羊Lys需要量的評(píng)定。選取3只哈薩克羊（體重42.5±0.4 kg，6月齡）手術(shù)安裝十二指腸瘺管，代謝籠內(nèi)單籠飼喂。通過往十二指腸灌注AA混合溶液，Lys的灌注量隨著試驗(yàn)周期的進(jìn)行逐漸減少。經(jīng)過第1-6 d的適應(yīng)期，在第7d進(jìn)

6、行IAAO的檢測(cè)。每只試驗(yàn)羊在進(jìn)行13C-Phe4 h[1.33 mg13C-Phe/(kg-h)]的持續(xù)灌注前，首先通過頸靜脈注射13C-Phe及13C-碳酸氫鈉啟動(dòng)劑量的0.67 mg/kg和0.18 mg/kg。呼出氣樣品在灌注的90，150和210min收集。呼出氣13CO2的豐度通過同位素質(zhì)譜儀來測(cè)定。Lys需要量的估計(jì)通過兩線性回歸模型以及Phe氧化率拐點(diǎn)分析得出。隨著灌注劑量的增加氧化速率呈線性下降（P＜0.001），呈現(xiàn)

7、劑量依賴性，高達(dá)2.94 g/d，與4.54～6.14 g/d無顯著差異（P＞0.05）。過瘤胃Lys的最低需要量因個(gè)別羔羊不同其變化范圍是6.09～6.92 g/d。本試驗(yàn)得出羔羊Lys需要量的平均估計(jì)為2.92±0.47 g/d。由先前的試驗(yàn)得知羔羊小腸Lys凈吸收量為3.46 g/d，因此總的Lys的最低需要量是6.38 g/d。
　　研究結(jié)果表明通過采用IAAOT測(cè)得新疆哈薩克羔羊Met和Lys的最低生理需要量分別為2.0