酞菁化合物在分析化學(xué)中的應(yīng)用研究.pdf

1、廈門(mén)大學(xué)博士學(xué)位論文酞菁化合物在分析化學(xué)中的應(yīng)用研究姓名：陳小蘭申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：許金鉤2001.6.1Abs仃actInChinese膠束介質(zhì)中FeTSPc催化過(guò)氧化氫氧化￡酪氨酸熒光反應(yīng)的催化反應(yīng)特性。結(jié)果表明，F(xiàn)eTSPc在該介質(zhì)中呈現(xiàn)出較高的催化活性，與相同條件下水相中的催化氧化反應(yīng)相比較，其催化活性提高了近15倍。第四章探討了離子締合作用在核酸測(cè)定中的應(yīng)用。本章共分為兩部分。第一部分將愛(ài)爾新藍(lán)8GX與陰

2、離子七次甲基花菁染料的離子締合作用應(yīng)用于核酸的定量，建立了核酸測(cè)定的新方法，并探索了其機(jī)理。該法具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏的特點(diǎn)，且發(fā)射波長(zhǎng)在近紅外區(qū)(795nm)，可有效避免生物樣品的背景干擾。對(duì)盆栽瓊棕DNA的測(cè)定表明了本法的實(shí)用性。第二部分將愛(ài)爾新藍(lán)8GX和模擬酶FeTSPc催化的熒光反應(yīng)相結(jié)合，用于核酸的定量測(cè)定。當(dāng)愛(ài)爾新藍(lán)8GX加入到FeTSPc過(guò)氧化氫對(duì)羥基苯乙酸的反應(yīng)體系中時(shí)，由r愛(ài)爾新藍(lán)8GX和FeTSPc的離子締合作用導(dǎo)致F

3、eTSPc的催化活性降低，表現(xiàn)為體系的熒光強(qiáng)度降低。當(dāng)痕量核酸存在時(shí)，由于核酸和愛(ài)爾新藍(lán)8GX之間強(qiáng)的相互作用，削弱了愛(ài)爾新藍(lán)8GX和FeTSPc的離子締合作用，導(dǎo)致Fe下SPc的催化活性恢復(fù)，表現(xiàn)為體系的熒光強(qiáng)度增大。借助于酶的高效放大作用，用此法測(cè)定核酸可達(dá)到較高的靈敏度。第五章探討了酞菁的共振光散射在生物大分子測(cè)定中的應(yīng)用。首先研究了四磺基鍋酞菁共振光散射在血清總蛋白測(cè)定中的應(yīng)用。四磺基鋁酞菁在2500～7500nm之間有弱的共振

4、光散射，在酸度合適的介質(zhì)中(如pH=30)中，蛋白能使其4130nm處的共振散射峰顯著增強(qiáng)，且增強(qiáng)程度與蛋白濃度呈良好的線性關(guān)系。據(jù)此，建立了血清中總蛋白的共振光散射增強(qiáng)的分析方法。該法靈敏度高、檢測(cè)限低、而且操作簡(jiǎn)單。其次探討了四氨基鋁酞菁共振光散射在痕量核酸測(cè)定中的應(yīng)用。我們觀察到，四氨基鋁酞菁在3000—8000nm之間有弱的共振光散射，痕量核酸的存在能使其400flnl處的共振散射峰顯著增強(qiáng)，增強(qiáng)的程度與核酸濃度之間呈良好的線性

5、關(guān)系。據(jù)此，建立了核酸定量測(cè)定的高靈敏度共振光散射增強(qiáng)分析方法。方法簡(jiǎn)單，靈敏度高。用于金黃色葡萄球菌DNA含量的測(cè)定，結(jié)果滿意。本論文的主要貢獻(xiàn)在于：(1)開(kāi)發(fā)并研究了辣根過(guò)氧化物酶及其模擬酶的新型紅區(qū)熒光底物四氨基鋁酞菁。探討了其作為熒光底物的可行性以及在痕量過(guò)氧化氫測(cè)定和在辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的酶聯(lián)吸附免疫分析中的應(yīng)用。與經(jīng)典的生熒底物相比，該熒光底物的主要優(yōu)點(diǎn)是紅區(qū)激發(fā)和發(fā)射，能有效地避開(kāi)背景熒光和散射光的干擾。此外，該底物易于合