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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)供者體內(nèi)應(yīng)用對(duì)外周血(PB)中Th17/Treg細(xì)胞的影響及其對(duì)CD4+T細(xì)胞中SOCS3基因表達(dá)的影響。
方法:
對(duì)12名供者皮下注射rhG-CSF5μg/(kg×d)連續(xù)5天,分別于動(dòng)員前及動(dòng)員后第3、5天采集外周血,第5天留取外周血造血干細(xì)胞產(chǎn)品。采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定動(dòng)員前后供者外周血及外周血干細(xì)胞中 Th17/Treg細(xì)胞比例變化;采用ELISA檢
2、測(cè)動(dòng)員前后供者外周血血清中IL-17A/IL-21/IL-23/TGF-β1細(xì)胞因子濃度變化;采用RT-PCR檢測(cè)動(dòng)員前后外周血和外周血造血干細(xì)胞采集物中 CD4+T細(xì)胞內(nèi)SOCS3基因的表達(dá)情況。
結(jié)果:
?、?Th17細(xì)胞比例:動(dòng)員后第三、五天及外周血干細(xì)胞采集物產(chǎn)品與動(dòng)員前相比分別為(0.9%±0.624% vs2.597%±1.993%)、(0.355%±0.359% vs2.597%±1.993%)、(0.1
3、93%±0.227%vs2.597%±1.993%),動(dòng)員后第五天、外周血干細(xì)胞采集物產(chǎn)品與動(dòng)員后第三天相比分別為(0.355%±0.359% vs0.9%±0.624%)、(0.193%±0.227%vs0.9%±0.624%),Th17細(xì)胞比例均明顯下降且具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);而外周血干細(xì)胞采集物產(chǎn)品與動(dòng)員后第五天相比(0.193%±0.227%vs0.355%±0.359%)Th17細(xì)胞比例下降亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(0.0
4、1
5、3.289±2.18%vs1.491±1.216%),Treg細(xì)胞比例均明顯升高且具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),而動(dòng)員后第三天與動(dòng)員前相比(0.731%±0.686%vs0.468%±0.522%)Treg細(xì)胞比例升高亦統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.01
6、),動(dòng)員后第五天與動(dòng)員后第三天相比(5.3±0.88pg/ml vs5.6±1.02pg/ml),IL-17A濃度均明顯下降,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);IL-21濃度:動(dòng)員后第三、五天與動(dòng)員前相比(115.18±13.4pg/ml vs134.53±16.08pg/ml)、(65.93±12.15pg/ml vs134.53±16.08pg/ml),動(dòng)員后第五天與動(dòng)員后第三天相比(65.93±12.15pg/ml vs115.
7、18±13.4pg/ml),IL-21濃度均明顯下降,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);④TGF-β1濃度:動(dòng)員后第三、五天與動(dòng)員前相比(285.59±70.79pg/ml vs183.51±60.36pg/ml)、(392.6±58.2pg/ml vs183.51±60.36pg/ml),動(dòng)員后第五天與動(dòng)員后第三天(392.6±58.2pg/ml vs285.59±70.79pg/ml)相比,TGF-β1濃度均明顯升高,具有顯著統(tǒng)計(jì)
8、學(xué)差異(P<0.01);⑤IL-23濃度:動(dòng)員后第三、五天與動(dòng)員前相比(46.21±7.46pg/ml vs45.69±6.92pg/ml)、(46.21±10.61pg/ml vs45.69±6.92pg/ml),動(dòng)員后第五天與動(dòng)員后第三天相比(46.21±10.61pg/ml vs46.21±7.46pg/ml),IL-23濃度變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);⑥r(nóng)hG-CSF動(dòng)員后外周血及干細(xì)胞采集物中CD4+T細(xì)胞內(nèi)SOCS3基
9、因的表達(dá)呈升高趨勢(shì),且動(dòng)員后第五天的外周血及外周血造血干細(xì)胞采集物中CD4+T細(xì)胞內(nèi)SOCS3基因的表達(dá)較動(dòng)員前明顯升高,相對(duì)量為動(dòng)員前的2倍多。
結(jié)論:
體內(nèi)應(yīng)用rhG-CSF可以調(diào)節(jié)Th17/Treg細(xì)胞比例:抑制供者外周血中Th17細(xì)胞的產(chǎn)生,促進(jìn) Treg細(xì)胞的產(chǎn)生,使得外周血造血干細(xì)胞采集物中 Th17細(xì)胞比例下降, Treg細(xì)胞比例升高;體內(nèi)應(yīng)用 rhG-CSF可以降低供者外周血血清中IL-17A/IL-
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