組蛋白H3乙?；虷3K9三甲基化參與胚胎型肌鈣蛋白I表達(dá)的調(diào)控.pdf

1、目的:在哺乳動(dòng)物的心臟當(dāng)中，肌鈣蛋白Ⅰ基因表達(dá)受到一種動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)程序的調(diào)控，包括心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和胚胎型肌鈣蛋白Ⅰ(ssTnⅠ)。ssTnⅠ首先在胚胎和胎兒的心臟中表達(dá)，然而在出生后，在一種未知的調(diào)控機(jī)制下，表達(dá)逐漸下降。
　　本次研究目的是為了探索組蛋白H3乙酰化和H3K9三甲基化是否參與ssTnⅠ基因時(shí)序性表達(dá)的調(diào)控。
　　方法:心臟標(biāo)本來自小鼠胎齡為15.5天胎鼠，新生鼠，生后7天鼠，生后14天鼠和生后21天鼠

2、。使用組蛋白乙?；贵w和三甲基化抗體進(jìn)行染色質(zhì)免疫共沉淀，檢測ssTnⅠ基因SURE域，最鄰近的啟動(dòng)子上游300bp區(qū)域和第一內(nèi)含子區(qū)域的組蛋白乙?；徒M蛋白三甲基化的水平。RT-PCR的方法來檢測相應(yīng)時(shí)間組ssTnⅠ的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.RT-PCR顯示ssTnⅠ表達(dá)隨時(shí)間推移逐漸下降，在生后21天時(shí)幾乎無表達(dá)。
　　2.cTnⅠ的表達(dá)在小鼠出生前變化不明顯，但在生后表達(dá)迅速增加，并在生后21天達(dá)