綠原酸、咖啡酸、阿魏酸干預(yù)補(bǔ)體旁路激活致內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的研究.pdf

1、目的：研究綠原酸及其代謝產(chǎn)物咖啡酸和阿魏酸對(duì)補(bǔ)體旁路激活導(dǎo)致人微血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)中相關(guān)粘附分子表達(dá)的干預(yù)作用。
　　方法：采用眼鏡蛇毒因子（CVF）激活血清補(bǔ)體旁路，激活產(chǎn)物作用于人微血管內(nèi)皮細(xì)胞，分別取多個(gè)時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)上清，采用ELISA方法檢測(cè)ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量，MTT法篩選多個(gè)不同濃度的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響，以確定合適的實(shí)驗(yàn)濃度，采用對(duì)細(xì)胞活力無(wú)影響的綠原

2、酸、咖啡酸、阿魏酸濃度預(yù)處理內(nèi)皮細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量，對(duì)細(xì)胞活力有影響的濃度，進(jìn)一步研究對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷情況。
　　結(jié)果：補(bǔ)體旁路途徑的激活物作用于微血管內(nèi)皮細(xì)胞后，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞活化，引起細(xì)胞上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的濃度上調(diào)。0.1、0.5 mmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸對(duì)細(xì)胞活力沒(méi)有影響，1.0、3.0、5.0 mmo

3、l·L-1綠原酸、咖啡酸、阿魏酸組對(duì)細(xì)胞活力有明顯的抑制作用。50、100、250μmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸可下調(diào)ICAM-1、IL-6、IL-8的表達(dá)。而大于1.0 mmol·L-1綠原酸、咖啡酸、阿魏酸可導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)明顯改變，細(xì)胞收縮，間隙變大，LDH釋放在24 h時(shí)間點(diǎn)明顯增加，各實(shí)驗(yàn)組的凋亡細(xì)胞比例明顯升高。
　　結(jié)論：50、100、250μmol·L-1的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸對(duì)炎癥反應(yīng)有干預(yù)作用。而大于1