神經(jīng)精神狼瘡靶抗原alpha-internexin捕獲及其自身抗體致病機(jī)理.pdf

1、神經(jīng)精神性狼瘡(neuropsychiatric systemic lupuserythematosus,NPSLE)是系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)常見(jiàn)而且嚴(yán)重的靶器官合并癥,其臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣,重癥NPSLE可直接危及患者生命或致殘,是SLE研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。1999年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)院(ACR)公布了NPSLE的19種臨床分類遍及了中樞神經(jīng)、周圍神經(jīng)和自主神經(jīng)系統(tǒng),其中,認(rèn)知障礙包括記憶缺失往往同時(shí)伴隨于各種NPSLE類型,或者作為NPSL

2、E一個(gè)獨(dú)立的臨床表型出現(xiàn),具有一定的代表性。
　　 作為系統(tǒng)性自身免疫病的原型,SLE的自身抗體作為生物標(biāo)記和致病因子一直是研究熱點(diǎn)之一。在NPSLE中已經(jīng)提示存在多種神經(jīng)組織特異性/或非特異性的自身抗體,部分可能通過(guò)與神經(jīng)組織抗原直接作用或間接交叉反應(yīng)介導(dǎo)了神經(jīng)系統(tǒng)的免疫損傷。本研究旨在通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)方法捕獲NPSLE新的靶抗原,并揭示其自身抗體在NPSLE可能的致病機(jī)制。獲得結(jié)果如下:
　　 1)應(yīng)用雙向電泳蛋白質(zhì)分

3、離技術(shù)結(jié)合免疫印跡,和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI TOF MS),鑒定和確認(rèn)了一種神經(jīng)元中間絲蛋白alpha-internexin(INA)為NPSLE新的靶抗原；
　　 2)應(yīng)用分子克隆獲得重組純化的INA蛋白并制備高效價(jià)多抗,以此建立了抗INA抗體檢測(cè)方法。通過(guò)對(duì)NPSLE及多個(gè)對(duì)照組的血清/腦脊液抗INA自身抗體檢測(cè)的群體驗(yàn)證,證實(shí)了在～50％的NPSLE患者血清和腦脊液中存在抗INA自身抗體；且該抗體的

4、滴度與認(rèn)知功能障礙和病情活動(dòng)性相關(guān)；
　　 3)進(jìn)一步建立動(dòng)物模型,C57小鼠主動(dòng)免疫INA+LPS處理后,出現(xiàn)明顯的認(rèn)知障礙,行為學(xué)表現(xiàn)和NPSLE相似,腦組織病理學(xué)提示了抗體介導(dǎo)的皮層和海馬神經(jīng)元凋亡；
　　 4)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)了抗INA抗體在大鼠胚胎原代神經(jīng)元培養(yǎng)中抑制了神經(jīng)元突起的生長(zhǎng),并進(jìn)一步介導(dǎo)了神經(jīng)元的凋亡。
　　 結(jié)論:本研究首次發(fā)現(xiàn)并確證了NPSLE患者存在抗中間絲蛋白INA的自身抗體,并通過(guò)一系