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文檔簡介
1、中藥天麻來源于蘭科植物天麻Gastrodia elataBl.的干燥塊莖;為常用的名貴中藥,也是我國衛(wèi)生部規(guī)定的可用于保健食品的原料。天麻的用量大,貨源短缺,價格高,有以羊角天麻等偽品充當天麻銷售的現(xiàn)象,真?zhèn)坞y以鑒別。同時,在商品流通中,根據(jù)天麻的性狀特征分為四個等級,還有栽培天麻和野生天麻之分。這些不同商品規(guī)格及等級天麻之間的價格差異很大,但質(zhì)量優(yōu)劣不明確。目前,天麻的真?zhèn)舞b別多用傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別法,標準化程度低,不易掌握;質(zhì)量評價僅以天
2、麻素含量為指標。根據(jù)文獻報道和課題組前期的研究工作結果表明,現(xiàn)行的鑒定方法難于有效地鑒別和評價天麻藥材的質(zhì)量。為此,本文運用現(xiàn)代分析技術,針對天麻的真?zhèn)?、?yōu)劣鑒定開展了以下三方面的研究工作:
第一、天麻藥材HPLC指紋圖譜的建立:通過優(yōu)化供試液制備方法和色譜條件,建立了得到分離度良好HPLC圖譜的方法。對收集的27份天麻藥材,5份天麻飲片,3份天麻粉末和3份冷凍干燥天麻樣品進行測定,發(fā)現(xiàn)這38份天麻樣品的HPLC圖譜相似,具有
3、共同的化學特性;選擇11個峰為天麻藥材HPLC圖譜的共有峰;經(jīng)對照品、保留時間和UV光譜比較,鑒定了7個峰,分別為天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷 A、巴利森苷 B、巴利森苷 C、巴利森苷 E和腺苷。再計算這27份天麻藥材HPLC圖譜的平均圖譜,作為天麻藥材的HPLC指紋圖譜。27份天麻藥材與指紋圖譜的相似度大于0.780;27份天麻藥材的聚類分析結果表明,除1份采收過種子的天麻塊莖外,其余樣品聚類相對較好。進一步對雙舌蟹甲草(羊角天麻)
4、、洋芋、芋、美人蕉、黃精、紅薯、栝樓等9份常見天麻的偽品進行比較,發(fā)現(xiàn)這些偽品的HPLC圖譜與天麻HPLC指紋圖譜明顯不同,未發(fā)現(xiàn)天麻素和巴利森苷類成分的峰,且與天麻指紋圖譜之間的相關系數(shù)低于0.042。對1份天麻酒的測定結果表明,其HPLC圖譜與建立的HPLC指紋圖譜相似,相關系數(shù)為0.966。說明所建立的天麻藥材HPLC指紋圖譜可準確鑒別天麻的真?zhèn)巍?br> 第二、天麻藥材 FTIR指紋圖譜的建立:通過樣品制備和光譜條件優(yōu)化,建立
5、了天麻FTIR光譜的測定方法。對27份天麻藥材和5份天麻飲片的紅外光譜及其二階導數(shù)光譜的分析結果表明,天麻的紅外光譜相似,其特征峰位于2929,1642,1515,1415,1371,1237,1154,1079,1023,930和857cm-1;并且在1154,1079和1023 cm-1的三個峰呈現(xiàn)明顯的“階梯峰”。通過計算27份天麻藥材FTIR光譜的平均圖譜作為天麻藥材的FTIR指紋圖譜。32份天麻藥材和飲片在1800~800 c
6、m-1范圍內(nèi)的紅外光譜與指紋圖譜的相關系數(shù)大于0.9771。進一步比較15份冬天麻與12份春天麻的紅外光譜,發(fā)現(xiàn)兩者紅外光譜峰的強度有明顯區(qū)別。春天麻在1730 cm-1和1515 cm-1附近的吸收峰強于冬天麻,但是,位于1154,1079和1023cm-1的“階梯峰C”不如冬天麻明顯。說明可用FTIR指紋圖譜區(qū)別冬天麻與春天麻。對雙舌蟹甲草(羊角天麻)、洋芋、芋、美人蕉、黃精、紅薯、栝樓等9份常見天麻偽品紅外光譜的分析表明,這些偽品
7、的紅外光譜中未發(fā)現(xiàn)1515cm-1芳香環(huán)骨架伸縮振動吸收峰,也多未見1154,1079和1023 cm-1的“階梯峰C”。說明紅外光譜可快速、準確地鑒別天麻的真?zhèn)巍?br> 第三、天麻商品等級與主要活性成分的相關性研究:首先,通過對樣品提取時間、溶劑、方法、色譜及光譜條件的考察和方法學驗證,建立了HPLC測定天麻素、總天麻素、對羥基苯甲醇、腺苷的方法和苯酚-硫酸法測定天麻多糖的方法。并針對天麻中天麻素的含量與傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別和商品等級劃分
8、相關性不顯著的問題,根據(jù)天麻素、對羥基苯甲醇、腺苷、多糖在天麻中含量高低及活性大小,采用加權評分法設置了各成分的權重系數(shù),建立了以天麻素、多糖等為指標成分綜合評價天麻藥材質(zhì)量的方法。其次,對35份冬天麻和11份春天麻進行了比較,發(fā)現(xiàn)兩者中天麻素、總天麻素和多糖的含量明顯不同(P<0.05)。冬天麻中天麻素含量(0.45%,n=35)比春天麻中天麻素含量(0.68%,n=11)低51.11%,冬天麻中總天麻素含量(1.98%,n=35)比
9、春天麻中天麻素含量(2.47%,n=11)低24.75%;相反,冬天麻中多糖的含量(26.75%,n=35)比春天麻中多糖含量(20.86%,n=11)高28.24%。兩種商品天麻中對羥基苯甲醇和腺苷的含量沒有明顯差異(P>0.05)。說明春天麻在土壤中越冬,春季發(fā)芽生長過程中,多糖消耗,含量降低;相反,天麻素及巴利森苷類等成分的含量可能因天麻質(zhì)量減輕而相對升高。由此可見,天麻性狀鑒別的優(yōu)劣與以天麻素為指標的評價結果不符,反而與以天麻多
10、糖為指標的評價結果相符。再次,根據(jù)天麻的分級標準,將35份冬天麻樣品分為四個等級,比較天麻素、總天麻素、對羥基苯甲醇、腺苷和多糖的含量,并用加權法計算綜合得分??偟内厔菔且?、二等天麻中這些成分的含量和得分高于三、四等。多糖含量與等級之間的相關性更明顯,分別為33.71%(n=8,一等)、34.44%(n=9,二等)、21.82%(n=11,三等)和16.68%(n=7,四等)。表明天麻重量越大,多糖含量及綜合評分越高。這與傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別天
11、麻質(zhì)量以個大、質(zhì)堅實者為佳相符合。由此可見,天麻多糖的含量和建立的多成分綜合評價方法,可作為天麻等級劃分的指標。最后,比較了四川、云南、陜西、湖北產(chǎn)天麻樣品中天麻素等成分的含量,發(fā)現(xiàn)四川、云南、陜西等天麻道地產(chǎn)區(qū)的天麻樣品中天麻素和多糖等含量較高,綜合評分也相對較高,四川省(50.60,n=12)>陜西?。?6.72,n=7)>云南?。?2.16,n=11)>湖北?。?4.44,n=4)。表明天麻藥材品質(zhì)與產(chǎn)地有關。
此外,對
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