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文檔簡介
1、目的:采用融合表達方式獲得T4N5蛋白,并對該蛋白進行脂質(zhì)體包被。
方法:通過全基因合成技術(shù)獲得含有凝血酶識別位點的基因序列,構(gòu)建重組表達載體pET-32a-thrombin-T4N5。轉(zhuǎn)化表達菌Origami DE3并篩選得到重組人T4N5的工程菌。經(jīng)基因測序和蛋白表達驗證后,進行發(fā)酵表達。純化回收的融合蛋白經(jīng)凝血酶酶切、鎳親和層析反相C18精純化,獲得高純度的重組T4N5蛋白,并進行脂質(zhì)體包被,通過體外實驗和動物實驗,初步
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