高血壓伴高同型半胱氨酸大鼠血管平滑肌細(xì)胞IRE1α和p-JNK的表達(dá)與血管重構(gòu)的關(guān)系及依葉片干預(yù)作用.pdf

1、研究背景：
　　高血壓是誘發(fā)心血管疾病（cardiac vascular disease，CVD）不良事件和影響其發(fā)病進(jìn)程的首要危險(xiǎn)因素，常作用于大腦、心臟、腎臟和眼等靶器官，引起上述器官終末端發(fā)生病變，如短暫性腦缺血發(fā)作和中風(fēng)、癡呆、左心室肥厚和心力衰竭、心絞痛、心肌梗塞、腎病、視網(wǎng)膜病變等。盡管高血壓的確切發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前通常認(rèn)為遺傳和環(huán)境因素以及兩者之間的相互關(guān)系，在其發(fā)病過(guò)程中占有重要作用?；诟哐獕簩?duì)遺傳—環(huán)境因素

2、的易感性，學(xué)者提出了很多假設(shè)來(lái)解釋高血壓的病理機(jī)制和發(fā)展過(guò)程。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是體內(nèi)蛋氨酸經(jīng)蛋氨酸循環(huán)途徑與半胱氨酸相互轉(zhuǎn)換時(shí)產(chǎn)生的一種含硫氨基酸。血漿中 Hcy水平的增高引起高同型半胱氨酸血癥（hyperhomocysteinemia，HHcy），通常被認(rèn)為是心腦血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。有研究顯示 Hcy和血壓之間存在因果關(guān)系，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)高濃度的Hcy能引起血壓的升高。Hcy引起血壓升高可能通過(guò)多種機(jī)

3、制,包括其對(duì)血管內(nèi)皮完整性的影響,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)顯示 Hcy干預(yù)可以引起內(nèi)皮細(xì)胞的破壞。此外,Hcy還可以誘導(dǎo)細(xì)胞氧化應(yīng)激、抑制H2S產(chǎn)生和減少血管舒張因子NO的利用。2010年版的《中國(guó)高血壓防治指南》第一次明確將 Hcy列為高血壓的危險(xiǎn)因素，我國(guó)目前約75％的高血壓患者存在 Hcy水平的偏高，因此我國(guó)學(xué)者將高血壓伴有血清Hcy≥10μmol／L定義為“H”型高血壓。
　　研究顯示，高 Hcy可以加重高血壓引起的血管重構(gòu)，但具體機(jī)制

4、尚不清楚。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum sress，ERS）是由于各種生理或者病理性因素，例如炎癥、氧化應(yīng)激、高糖、Ca2+異常、缺氧和Hcy等，引起細(xì)胞內(nèi)錯(cuò)誤/未折疊蛋白異常堆積在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔和一系列信號(hào)傳導(dǎo)的過(guò)程。適宜的ERS有利于恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)Ca2+穩(wěn)態(tài)和蛋白質(zhì)折疊功能，增強(qiáng)細(xì)胞耐受應(yīng)激刺激和環(huán)境適應(yīng)的能力，嚴(yán)重而持續(xù)的ERS則可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。目前認(rèn)為有三種蛋白在ERS中發(fā)揮著重要作用，即需肌醇酶1（IRE1

5、）、活化轉(zhuǎn)錄因子6(ATF6)和蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶（PERK）。研究顯示，很多心血管疾病如缺血性心肌病、心肌肥厚、心衰、動(dòng)脈粥樣硬化和高血壓等都與ERS有關(guān)。
　　有研究指出，高血壓伴HHcy的治療策略，應(yīng)考慮到總體治療依從性和經(jīng)濟(jì)效益比，我國(guó)學(xué)者推薦含有0.8mg葉酸的固定復(fù)方制劑降壓藥。馬來(lái)酸依那普利葉酸片（依葉片）是我國(guó)研制的一種 ACEI類(lèi)固定復(fù)方制劑，其具有降血壓及降 Hcy的雙重療效，可以共同降低高血壓伴高 Hcy患者

6、的致病風(fēng)險(xiǎn)。但是，依葉片對(duì)高血壓伴HHcy引起的血管重構(gòu)的干預(yù)效果和機(jī)制，尚未明確。
　　研究目的：
　　研究高血壓伴HHcy大鼠血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時(shí)，IRE1α和p-JNK的表達(dá)與高血壓血管重構(gòu)的關(guān)系及依那普利葉酸片對(duì)其干預(yù)效果，為“H型”高血壓的防治提供理論依據(jù)和思路。
　　研究方法：
　　60只成年雄性 SD大鼠行部分腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)（ PAAC），術(shù)后2周選SBP≥140mmHg（1mmHg=0.13

7、3kPa）大鼠36只隨機(jī)等分為3組。對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)并雙蒸水灌胃，模型組給予2.5%蛋氨酸飼料喂養(yǎng)并雙蒸水灌胃，依葉組給與2.5%蛋氨酸飼料喂養(yǎng)并依葉片[10mg/(kg·d)]灌胃。于術(shù)后2周、術(shù)后6周和術(shù)后10周測(cè)尾動(dòng)脈SBP和血清Hcy值；術(shù)后10周，HE染色觀察胸主動(dòng)脈形態(tài)變化；測(cè)圖軟件觀察胸主動(dòng)脈中層厚度變化；免疫組化和 Western blot檢測(cè)血管平滑肌細(xì)胞IRE1α和p-JNK的表達(dá)。
　　研究結(jié)果：

8、>　?、傩g(shù)后2W,對(duì)照組、模型組和依葉組大鼠的尾動(dòng)脈SBP和血清Hcy值，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。②術(shù)后6周，模型組大鼠尾動(dòng)脈SBP稍高于相應(yīng)對(duì)照組（P＞0.05）；血清Hcy值明顯低于相應(yīng)對(duì)照組（P＜0.01）。③術(shù)后10W,與對(duì)照組相比，模型組大鼠尾動(dòng)脈SBP升高較為明顯（P＜0.05）；血清Hcy值顯著升高（P＜0.01）；胸主動(dòng)脈中層厚度明顯增厚（P＜0.05）。④術(shù)后10W，與對(duì)照組相比，模型組大鼠IRE1α和p-J

9、NK免疫組化評(píng)分和Western blot表達(dá)均升高（P＜0.05）。⑤依葉片干預(yù)后，術(shù)后10W，依葉組大鼠尾動(dòng)脈SBP、血清Hcy值、胸主動(dòng)脈中層厚度均低于模型組（P＜0.01）；依葉組大鼠IRE1α和p-JNK免疫組化評(píng)分和Western blot表達(dá)均明顯降低（P＜0.01）。
　　研究結(jié)論：
　　PAAC造成大鼠后負(fù)荷增加，引起血管平滑肌細(xì)胞ERS, IRE1α和p-JNK被激活，而高蛋氨酸飲食造成大鼠血清Hcy的升