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1、目的:探討普通肝素(UFH)是否抑制脂多糖(LPS)誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)細胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達。
方法:體外培養(yǎng)HUVECs傳代至第4~5代用于實驗。將傳代后的細胞隨機分為4組:正常對照組;LPS刺激組(LPS10μg/ml);普通肝素(UFH)+LPS組(UFH10 U/ml+LPS10μg/ml);普通肝素組(UFH10 U/ml)。普通肝素+LPS組于LPS刺激前15min加入10 U
2、/ml的普通肝素,后加入LPS對HUVECs進行刺激。各組分別于LPS刺激后的6h及12h收集HUVECs并提取各自細胞組的總RNA,將所提取的總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后,應(yīng)用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(real-timequantative polymerase chain reaction,qRT-PCR)的方法檢測各組細胞中ICAM-1mRNA的水平變化,并依據(jù)數(shù)據(jù)結(jié)果進行組間比較分析。
結(jié)果:與正常對組相比較,L
3、PS刺激組ICAM-1 mRNA的表達水平明顯增加,6h達到高峰,12h其表達呈現(xiàn)下降趨勢(6h:15.91±1.64比7.59±0.93;12h:12.00±0.51比6.59±0.29)。與LPS組相比較,普通肝素預處理組明顯降低6h及12hICAM-1 mRNA的表達水平(6h:10.59±1.24比15.91±1.64,12h:8.05±0.89比12.00±0.51)。差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與正常對照組相比較,普
4、通肝素組ICAM-1 mRNA的表達水平無明顯變化(6h:7.72±0.89比7.59±0.93;12h:5.74±1.38比6.59±0.29)。差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
結(jié)論:脂多糖刺激下HUVECs表達ICAM-Ⅰ mRNA的水平明顯增加,6h達到高峰之后呈逐漸下降趨勢。普通肝素降低了LPS刺激下HUVECs表達ICAM-ⅠmRNA的水平,提示肝素抑制LPS誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞ICAM-1表達,對LPS刺激的
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