艾滋病熱毒蘊結(jié)證特異性mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　探討艾滋病熱毒蘊結(jié)證與差異mRNA表達(dá)的相關(guān)性，以期發(fā)現(xiàn)艾滋病熱毒蘊結(jié)證的特異性表達(dá)mRNAs，探索其形成的分子生物學(xué)本質(zhì)，為艾滋病中醫(yī)證候診斷的客觀化提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　本研究在前期芯片篩選的結(jié)果中通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)及數(shù)據(jù)分析選取艾滋病熱毒蘊結(jié)證差異基因10條。10條基因是：CHP1、APOBEC3F、CDA、GGT1、CHI3L1、ZEB1、KLF10、ATAD1、SP3、IL7R。運用實時熒

2、光定量PCR技術(shù)（Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）對采集的艾滋病期熱毒蘊結(jié)證、無癥狀期熱毒蘊結(jié)證及正常對照組的血液標(biāo)本進(jìn)行上述目的mRNA的mRNA表達(dá)量檢測，以GAPDH作為內(nèi)參基因進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，對目的基因的2-△CT值來表示其相對表達(dá)量。運用SPSS V20.0統(tǒng)計軟件分析目的mRNA在艾滋病期組、無癥狀期組和正常對照組之間的的差異表達(dá)關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1）艾滋病期組與正常對照組

3、比較：CHI3L1、CDA、APOBEC3F在艾滋病期熱熱毒蘊結(jié)證患者中表達(dá)下調(diào)，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與芯片篩選結(jié)果相一致；CHP1、GGT1、ZEB1、KLF10、ATAD1等基因雖表達(dá)下調(diào)與芯片篩選結(jié)果一致，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。SP3、IL7R無統(tǒng)計學(xué)差異，表達(dá)上下調(diào)也與芯片結(jié)果不一致。
　　2）無癥狀期組與正常對照組比較：CHP1、APOBEC3F、CDA、GGT1在艾滋病期熱熱毒蘊結(jié)證患者中

4、表達(dá)下調(diào)，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與芯片篩選結(jié)果相一致；CHI3L1、ZEB1、KLF10、ATAD1等基因雖表達(dá)下調(diào)與芯片篩選結(jié)果一致，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。SP3、IL7R無統(tǒng)計學(xué)差異，表達(dá)上下調(diào)也與芯片結(jié)果不一致。
　　3）艾滋病期組與無癥狀期組比較：CHI3L1在艾滋病期與無癥狀期均表達(dá)下調(diào)，且兩組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；CDA、APOBEC3F、CHP1、GGT1、ZEB1、KLF

5、10、ATAD1、SP3、IL7R等基因在艾滋病期與無癥狀期均表達(dá)下調(diào)，但兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.艾滋病期熱毒蘊結(jié)證和無癥狀期熱毒蘊結(jié)證的特異性表達(dá)mRNA存在差異，在艾滋病期熱毒蘊結(jié)證中的特異性表達(dá)mRNA是：CHI3L1，主要涉及Th1/Th2反應(yīng)、炎性細(xì)胞活化與凋亡、新生血管生成、組織修復(fù)與重塑等功能可能是艾滋病期熱毒蘊結(jié)證的形成的生物學(xué)本質(zhì)；在無癥狀期熱毒蘊結(jié)證的特異性表達(dá)mRN

6、A是：CHP1、GGT1，主要涉及細(xì)胞的生長和凋亡、炎癥調(diào)節(jié)、氧化應(yīng)激反應(yīng)、抑制腫瘤細(xì)胞的生長等功能，這可能是導(dǎo)致無癥狀期熱毒蘊結(jié)證形成的生物學(xué)本質(zhì)。
　　2.艾滋病期熱毒蘊結(jié)證和無癥狀期熱毒蘊結(jié)證亦具有共同的特異性表達(dá)mRNA：CDA、APOBEC3F，這兩個基因在上述兩期中的表達(dá)無顯著差異，提示這兩條基因與艾滋病分期無關(guān)，與艾滋病熱毒蘊結(jié)證有關(guān)。上述基因的作用主要涉及胞苷脫氫反應(yīng)、抑制HIV的復(fù)制等，可能在艾滋病的病理生理過程