齲病和牙周病發(fā)病相關(guān)性及其唾液微生物群落結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、目的：
　　1.調(diào)查分析不同牙周狀況患者的患齲情況，及不同齲敏感患者牙周健康狀況有無差異，以探討齲病和牙周病發(fā)病的關(guān)聯(lián)性。
　　2.利用PCR-DGGE分子技術(shù)對(duì)侵襲性牙周炎患者和高齲患者唾液微生物群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較研究，從微生物學(xué)角度探討牙周病和齲病發(fā)病的相關(guān)性，以期為齲病和牙周病發(fā)病機(jī)制的研究提供新思路。
　　方法：
　　1.對(duì)蘭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院就診的229名患者進(jìn)行口腔檢查記錄，根據(jù)不同牙周狀況分為牙周健康組

2、（HP組）、牙齦炎組（GI組）、慢性牙周炎組（CP組）和侵襲性牙周炎組（AgP組）；根據(jù)不同齲敏感狀況分為無齲組（FC組）、低齲組（MC組）和高齲組（SC組）。使用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)四組不同牙周狀況患者齲失補(bǔ)指數(shù)（DMFT），及三組不同齲敏感患者社區(qū)牙周指數(shù)（CPI）進(jìn)行分析。
　　2.以10名侵襲性牙周炎患者和10名高齲患者為研究對(duì)象，收集非刺激性唾液樣本并提取DNA，16S rRNA基因擴(kuò)增后進(jìn)行DGGE凝膠電泳分析

3、，利用quantity one4.6.2等軟件進(jìn)行微生物群落結(jié)構(gòu)差異性分析。
　　結(jié)果：
　　1.與AgP組相比，HP組、GI組、CP組的DMFT均較高（P<0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示侵襲性牙周炎患者患齲率較低。
　　2.與SC組相比，F(xiàn)C組的CPI較高（P<0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示高齲患者的牙周健康狀況相對(duì)較好。
　　3.136例高齲患者中，侵襲性牙周炎檢出率最低，僅為2％；其次為慢性牙周炎16%

4、，提示高齲患者較少合并發(fā)生侵襲性牙周炎。
　　4.細(xì)菌通用引物Bac1和Bac2對(duì)唾液樣本微生物16S rRNA基因進(jìn)行擴(kuò)增，經(jīng)瓊脂糖和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，其擴(kuò)增量大，DNA主帶明顯，濃度≥300ng/μl。
　　5.16例唾液樣本PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)DGGE電泳，可在DGGE圖譜上看到明確的區(qū)分，未見有完全相同的泳道出現(xiàn)，同一實(shí)驗(yàn)組間存在共有的亮條帶，侵襲性牙周炎組有2條共有條帶，高齲組有3條共有條帶。
　　6．高齲組和

5、侵襲性牙周炎組戴斯相似性系數(shù)（Cs）介于0.3%～43.4%之間；侵襲性牙周炎組和齲病組內(nèi)Cs則分別是24.6%～76.3%、19.3%～73.4%。
　　7．UPGAM系統(tǒng)發(fā)育樹中，高齲組和侵襲性牙周炎組明顯形成兩個(gè)聚類群，其相似性系數(shù)低于0.21；侵襲性牙周炎組Ag-9和Ag-13相似性高達(dá)0.76，高齲組CH-1和CH-2、CH-5和CH-3相似性則分別為0.73和0.72。
　　結(jié)論：
　　1.侵襲性牙周炎與齲