苦瓜皂苷與黃連素混合物對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠的降血糖作用及預(yù)防糖尿病并發(fā)癥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過建立Ⅱ型糖尿病小鼠模型，探討苦瓜皂苷和黃連素混合物的降糖作用，并應(yīng)用血肌酐(SCr)、尿肌酐(UCr)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、尿微量蛋白(mALB)、糖化血紅蛋白(GHbA1c)和形態(tài)學(xué)觀察等指標(biāo)，探討苦瓜皂苷和黃連素混合物對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠的降血脂作用及糖尿病小鼠腎功能的保護(hù)作用，從糖代謝、脂代謝及腎臟損傷保護(hù)方面探討其機(jī)制，為預(yù)防糖尿癥并發(fā)癥提供理論依據(jù)。
　　 方法:連續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料（基礎(chǔ)飼料78.8

2、％，蛋黃粉10％，豬油10％，膽固醇1％，膽酸鈉0.2％）2周建立昆明種小鼠高脂血癥模型，再通過單次高劑量(200 mg/kg)腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)復(fù)制實(shí)驗(yàn)性小鼠Ⅱ型糖尿病模型。糖尿病小鼠模型造模成功后，將糖尿病小鼠隨機(jī)分配到模型對(duì)照組（B組），羅格列酮組（C組），苦瓜皂苷組（D組），苦瓜皂苷與黃連素混合物組（E組）中，并設(shè)立正常對(duì)照組（A組）。連續(xù)灌胃處理12周后，測(cè)定各組小鼠的體重、肝臟重量、腎臟重量，均以試劑盒的規(guī)定嚴(yán)格運(yùn)

3、用生化分析方法檢測(cè)血糖濃度(GLU)、糖耐量、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(SCr)、尿肌酐(UCr)等指標(biāo)，并按照酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的試劑盒的規(guī)定嚴(yán)格運(yùn)用雙抗體一步夾心法檢測(cè)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、尿微量蛋白(mALB)和糖化血紅蛋白(GHbA1c)等指標(biāo)。
　　 結(jié)果:
　　 1、100只造模小鼠中有96只造模成功
　　 經(jīng)過4周的高脂飼料喂養(yǎng)后，禁食12h，對(duì)造模小鼠進(jìn)行鏈脲佐菌素(

4、STZ)檸檬酸-檸檬酸鈉溶液腹腔注射處理，注射鏈脲佐菌素(STZ)3天后，禁食12h，尾靜脈取血測(cè)其空腹血糖，造模的100只小鼠中有96只空腹血糖≥11.1mmol/L，即有96只實(shí)驗(yàn)性Ⅱ型糖尿病小鼠模型復(fù)制成功。
　　 2、苦瓜皂苷和黃連素混合物組小鼠的一般情況觀察有明顯改善
　　 從一般情況的觀察結(jié)果來看，苦瓜皂苷與黃連素的混合物能使實(shí)驗(yàn)性Ⅱ型糖尿病小鼠精神好轉(zhuǎn)，體重上升。在造模成功以后，除了正常對(duì)照組（A組）外的其

5、余各組小鼠體重都有明顯下降趨勢(shì)，并與正常對(duì)照組(A組)比較具有極顯著性差異(P＜0.01)。給藥3周后，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）小鼠體重都有不同程度的回升，與模型對(duì)照組（B組）比較差異沒有顯著性(P＞0.05);給藥6周、9周、12周后，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）小鼠體重明顯回升，與模型對(duì)照組（B組）比較差異顯著(P＜0.05)。
　　

6、 3、苦瓜皂苷和黃連素混合物對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖降低效果明顯
　　 Ⅱ型糖尿病模型小鼠復(fù)制成功時(shí)與正常對(duì)照組（A組）比較，模型各組小鼠空腹血糖值均有明顯的升高(P＜0.01)。給藥2周后，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）與模型對(duì)照組（B組）比較，各給藥組的小鼠空腹血糖值都有不同程度下降;給藥4周后，與模型對(duì)照組（B組）比較，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組

7、（E組）小鼠空腹血糖值都有極顯著的下降(P＜0.01);從給藥4周，直到給藥12周，除了模型對(duì)照組（B組）小鼠血糖仍有小幅度上升趨勢(shì)外，其他各組小鼠血糖基本都是在一定血糖值范圍內(nèi)保持平穩(wěn)。其中，苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）的效果明顯。
　　 4、苦瓜皂苷和黃連素混合物對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠的糖耐量有明顯改善作用
　　 從糖耐量實(shí)驗(yàn)我們得知，正常對(duì)照組（A組）小鼠餐后0.5h時(shí)血糖值達(dá)到了頂峰，餐后1.5h時(shí)血糖值已基本回到

8、餐前水平。模型對(duì)照組(B組)小鼠在餐后1h時(shí)才達(dá)到血糖值頂峰，之后一直處于高血糖狀態(tài)?？喙显碥战M（D組）小鼠在餐后0.5h時(shí)血糖值達(dá)到頂峰，但在餐后1h時(shí)血糖下降的不多，餐后2h血糖基本恢復(fù)餐前水平。羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）小鼠均在餐后0.5h時(shí)達(dá)到血糖值頂峰，在餐后1h的時(shí)侯兩組小鼠的血糖值基本相同，在餐后2h的時(shí)侯兩組小鼠的血糖基本恢復(fù)到餐前水平，血糖值稍高于正常對(duì)照組。
　　 5、苦瓜皂苷和黃連

9、素混合物能顯著降低Ⅱ型糖尿病小鼠體內(nèi)的總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)
　　 通過4周的給藥治療，各處理組小鼠與模型對(duì)照組（B組）比較，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組(E組)均能極顯著地降低Ⅱ型糖尿病小鼠血清中總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)(P＜0.01)的含量。
　　 6、苦瓜皂苷和黃連素混合物能顯著降低Ⅱ型糖尿病小鼠體內(nèi)的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）、尿微量蛋白(mALB

10、)、糖化血紅蛋白(GHbA1c)含量
　　 通過12周給藥治療，各處理組與模型對(duì)照組（B組）對(duì)比，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）小鼠體內(nèi)的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、尿微量蛋白(mALB)、糖化血紅蛋白(GHbA1c)含量均明顯的下降(P＜0.01)。其中，苦瓜皂苷與黃連素的混合物的效果最顯著。
　　 7、苦瓜皂苷和黃連素混合物對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠體內(nèi)的血肌酐(SCr)、尿肌

11、酐(UCr)影響顯著
　　 通過12周給藥治療，各處理組與模型對(duì)照組（B組）對(duì)比，羅格列酮組（C組）、苦瓜皂苷組（D組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）小鼠體內(nèi)的血肌酐(SCr)含量均明顯的下降(P＜0.01)，尿肌酐(UCr)含量均明顯升高(P＜0.01)。其中，苦瓜皂苷與黃連素的混合物的效果最為顯著。
　　 8、苦瓜皂苷和黃連素混合物對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠的腎臟有一定保護(hù)作用
　　 通過12周給藥治療，觀察正常對(duì)

12、照組（A組），模型對(duì)照組（B組）、苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）小鼠的腎臟切片，發(fā)現(xiàn)正常對(duì)照組(A組)腎小球、腎小管部位未見明顯異常;模型對(duì)照組（B組）腎小球囊腔增大，出現(xiàn)明顯變形;腎小管損傷嚴(yán)重，上皮細(xì)胞炎性腫大，部分腎小管內(nèi)有蛋白;苦瓜皂苷和黃連素混合物組（E組）腎小管上皮細(xì)胞炎癥明顯恢復(fù)，但部分腎小管內(nèi)還有少量蛋白。
　　 結(jié)論:苦瓜皂苷與黃連素的混合物能顯著地調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)性Ⅱ型糖尿病小鼠糖代謝和脂代謝，降低總膽固醇(TC)