S100A8蛋白質(zhì)與泌尿第草酸鈣結(jié)石的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)觀察草酸鈣結(jié)石病人尿液中S100A8蛋白質(zhì)與健康人尿液中S100A8蛋白質(zhì)差異性表達(dá)程度，以及在體外模型中對(duì)比不同濃度的S100A8蛋白質(zhì)的變化，探討S100A8蛋白質(zhì)在草酸鈣結(jié)石形成過(guò)程中的功能。在體外構(gòu)建草酸鈣結(jié)晶模型，采用種晶技術(shù)檢測(cè)不同濃度的S100A8蛋白質(zhì)對(duì)體外草酸鈣（CaOx）結(jié)石晶體生長(zhǎng)抑制指數(shù)，檢測(cè)其結(jié)晶誘導(dǎo)時(shí)間，成核和聚集速率。在體外觀察不同濃度的S100A8蛋白質(zhì)對(duì)草酸鈣晶型形成的影響。

2、>　　方法：
　?。?）收集從2014年9月至2015年9月期間我院通過(guò)手術(shù)取石術(shù)后臨床上尿路結(jié)石標(biāo)本并進(jìn)行結(jié)石成分分析得到草酸鈣成分的標(biāo)本共50例，收集相應(yīng)草酸鈣結(jié)石病人入院后手術(shù)前晨尿標(biāo)本，共50例，及健康人（未患結(jié)石疾?。┠蛞簶?biāo)本50例。采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)分別檢測(cè)草酸鈣結(jié)石標(biāo)本、結(jié)石病人尿液標(biāo)本和健康人尿液標(biāo)本中的S100A8蛋白濃度。
　?。?）采用種晶技術(shù)構(gòu)建體外結(jié)石晶體模型，設(shè)置多組不同濃度梯度的

3、S100A8蛋白，將其加入上述各模型中，使S100A8蛋白質(zhì)對(duì)結(jié)石模型充分混合進(jìn)行反應(yīng)與作用，使用原子吸收分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算并統(tǒng)計(jì)草酸鈣晶體生長(zhǎng)抑制指數(shù)。
　?。?）使用原子吸收分光光度計(jì)檢測(cè)加入不同濃度S100A8蛋白質(zhì)的草酸鈣溶液的吸光度值，并繪制成核聚集曲線，計(jì)算草酸鈣晶體生長(zhǎng)誘導(dǎo)時(shí)間，成核速率和聚集速率。
　?。?）在體外構(gòu)建的草酸鈣模型中，加入不同濃度的S100A8蛋白質(zhì)，使用電子顯微鏡進(jìn)行觀察，了解所形成的

4、草酸鈣結(jié)石晶體形貌、尺寸大小以及不同晶體的所占的比例。
　?。?）統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)用-x±s表示，使用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組數(shù)據(jù)比較，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，多組數(shù)據(jù)間比較，采用單因素方差分析。
　　結(jié)果：
　?。?）草酸鈣結(jié)石標(biāo)本中含有S100A8蛋白質(zhì)，且其濃度值的范圍為：6.231±0.251ng/mL。
　?。?）草酸鈣結(jié)石病人尿液中及健康人（未患結(jié)石疾?。┠蛞簶?biāo)本中均含有S

5、100A8蛋白質(zhì)，但是草酸鈣結(jié)石病人尿液標(biāo)本中的S100A8蛋白質(zhì)濃度范圍為：56.258±0.229ng/mL，而健康人（未患結(jié)石疾?。┠蛞簶?biāo)本中的S100A8蛋白質(zhì)濃度范圍為：13.589±0.236ng/mL，實(shí)驗(yàn)組和正常組對(duì)比，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）?？梢钥闯霾菟徕}結(jié)石病人的尿液標(biāo)本中的S100A8蛋白質(zhì)濃度明顯高于健康人尿液標(biāo)本。
　?。?）體外實(shí)驗(yàn)表明不同濃度的S100A8蛋白質(zhì)體外對(duì)草酸鈣結(jié)晶生長(zhǎng)的抑制

6、作用：隨蛋白質(zhì)濃度增加，它對(duì)草酸鈣結(jié)石晶體生長(zhǎng)的抑制指數(shù)逐漸降低，而且，組間差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）通過(guò)分光光度計(jì)將各組加有不同濃度的S100A8蛋白質(zhì)的草酸鈣溶液進(jìn)行檢測(cè)和計(jì)算晶體最大誘導(dǎo)時(shí)間Tmax、成核速率SN和聚集速率SA參數(shù)值比較發(fā)現(xiàn)，在添加不同濃度S100A8蛋白質(zhì)的情況下，Tmax減少，SN和SA都有所上升，且隨著蛋白質(zhì)濃度的升高，Tmax逐漸減小，而SN和SA逐漸增大。
　?。?）在

7、S100A8蛋白質(zhì)干預(yù)的草酸鈣結(jié)石模型中，均有截面為六邊形的晶體與雙四棱錐型的晶體產(chǎn)生，但是不同晶型的比例有區(qū)別。隨著S100A8蛋白質(zhì)濃度的增加，截面為六邊形的晶體的比例和尺寸大小逐漸增大，雙四棱錐型的晶體比例和尺寸大小逐漸減小。
　　結(jié)論：
　?。?）泌尿系草酸鈣結(jié)石中含有一定量的S100A8蛋白質(zhì)。
　?。?）草酸鈣結(jié)石病人尿液中及健康人（未患結(jié)石疾?。┠蛞簶?biāo)本中均含有S100A8蛋白質(zhì)，且草酸鈣結(jié)石病人尿液S1

8、00A8蛋白質(zhì)濃度高于健康人，其差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?。?）S100A8蛋白質(zhì)在隨著濃度的升高，在體外的草酸鈣晶體能夠有效地促進(jìn)尿草酸鈣晶體成核和聚集。
　?。?）低濃度S100A8蛋白質(zhì)干預(yù)所形成的草酸鈣晶體類型為COD，不易粘附和沉積，更有利于人體排出，而高濃度的S100A8蛋白質(zhì)干預(yù)所形成的草酸鈣晶體類型為COM，不易隨尿液排出。
　　（5）草酸鈣結(jié)石患者結(jié)石標(biāo)本中的S100A8蛋白質(zhì)的過(guò)度表達(dá)及其尿液中S