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文檔簡介
1、雪膽(Hemsleya amabilis)屬于葫蘆目葫蘆科(Cucurbitaceae)雪膽屬(Hemsleya Cogn)植物,主產于亞洲亞熱帶至溫帶地區(qū)。金佛山雪膽含有四環(huán)三萜類和五環(huán)三萜類化合物,具有清熱解毒、抗菌消炎等多種功效,以治療菌痢、腸炎、支氣管炎及急性扁桃體炎等應用于臨床。
目的:1)對金佛山雪膽(Hemsleya pengxianensis var. jinfushanensis)進行化學成分的分離與鑒定。<
2、br> 2)對分離所得雪膽單體化合物進行多種癌細胞的細胞毒活性篩選。
3)對所有單體化合物進行斑馬魚新生血管抑制試驗,探索其抗腫瘤機制。
方法:采用色譜技術(硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、反相柱色譜、制備HPLC色譜)、重結晶等手段,對雪膽乙酸乙酯部位和正丁醇部位進行化學成分研究,通過運用紫外光譜、紅外光譜、質譜、核磁共振波譜等技術對分離所得的單體化合物進行結構鑒定;應用MTT法對分離得到的單體化合物進行H460(人肺腺
3、癌)、DU145(人前列腺癌)、SW620(人結腸癌)細胞毒活性篩選;應用轉基因(trangenosis,TG)血管熒光斑馬魚(VEGFR2:GFP)作為實驗模型動物,通過普通顯微鏡及熒光顯微鏡檢測不同劑量金佛山雪膽單體化合物影響斑馬魚胚胎背部節(jié)間血管(intersegment vessels,ISV)的生成情況。
結果:從金佛山雪膽中共分離得到26個化合物。分別鑒定為:Hemslepencins A(1)、Hemslepen
4、cins B(2)、Hemslepencins C(3)、Hemslepencins D(4)、16,25-乙酰基葫蘆素F(5)、Hemslepenside B(6)、Hemslepenside C(7)、Hemslepenside D(8)、Hemslepenside E(9)、Hemslepenside F(10)、Hemslepenside G(11)、Hemslepenside H(12)、Hemslepenside I(13)
5、、3β-hydroxycucurbita-5,24-diene-11-one-26-methy-27-O-β-D-glucopyranosyl(1?6)-β-D-gluc opyranoside(14)、3β,11,26-trihydroxycucurbita-5,24-dien-26-O-β-D-glucopyranosyl(1?6)-β-D-glucopyranoside(15)、雪膽素G(16)、Hexanorcucurbitac
6、in F(17)、Scandenogenin A(18)、16,25-二乙酰基-23,24-二氫葫蘆素F(19)、雪膽甲素苷(20)、jinfushanosides B(21)、jinfushanosides G(22)、短柄雪膽皂苷 D(23)、Carnosifloside I(24)、jinfushanosides C(25)、jinfushanosides D(26)。對其中含量較多的化合物進行細胞毒活性篩選,結果表明新化合物5,
7、6,7,8細胞毒活性強且抑制作用呈濃度依賴性。對所有單體化合物進行斑馬魚新生血管抑制試驗,篩選得到化合物2,3,5,6,8,10,19的中、高劑量組出現熒光缺失、血管變細、部分缺失,對斑馬魚新生血管有一定的抑制作用。
結論:共分得化合物26個,其中新化合物13個,已知化合物12個,首次從自然界中分到的化合物1個?;衔?,6,7,8對H460(人肺腺癌)、DU145(人前列腺癌)、SW-620(人結腸癌)均有較強的細胞毒活性。
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