利用CRISPR-Cas9建立膽堿能神經(jīng)元GFP特異性標(biāo)記的人類(lèi)胚胎干細(xì)胞系.pdf

1、膽堿能神經(jīng)元(cholinergic neuron)是能合成乙酰膽堿并且以乙酰膽堿(Ach)為遞質(zhì)的神經(jīng)元，在體內(nèi)的分布非常廣泛。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的膽堿能神經(jīng)元與學(xué)習(xí)、記憶以及注意力密切相關(guān)。膽堿能神經(jīng)元的病變會(huì)引起阿爾茨海默癥等嚴(yán)重的神經(jīng)退化性疾病。獲得膽堿能神經(jīng)元特異標(biāo)記的細(xì)胞系，可以更好地了解膽堿能神經(jīng)元的分化、生理生化特性及引起阿爾茨海默癥等嚴(yán)重的神經(jīng)退化性疾病的病理機(jī)制。然而，已有的能夠特異性標(biāo)記膽堿能神經(jīng)元的細(xì)胞均為動(dòng)物來(lái)源，

2、缺乏相應(yīng)的人來(lái)源的細(xì)胞系。
　　為了獲得特異性標(biāo)記的膽堿能神經(jīng)元人源細(xì)胞系，本文利用最新的基因編輯技術(shù)—CRISPR(Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeats)/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建了由膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(Choline acetyltransferase，ChAT）基因內(nèi)源性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)zsGreen的膽堿能神經(jīng)元特異性標(biāo)記的人胚胎干細(xì)胞(human embryo