一例遺傳性凝血因子Ⅶ缺乏癥家系的基因突變及臨床表型分析.pdf

1、目的:對(duì)1例遺傳性凝血因子Ⅶ缺乏癥家系的基因突變進(jìn)行研究，并探討基因型與臨床表型之間的關(guān)系。
　　方法:對(duì)一位遺傳性FⅦ缺乏癥女性先證者及其家系成員進(jìn)行凝血功能、凝血因子活性以及凝血糾正實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，并對(duì)其家系成員患病情況調(diào)查;用PCR法（聚合酶鏈反應(yīng)）對(duì)家系所有成員的FⅦ基因外顯子及其側(cè)翼和啟動(dòng)子區(qū)域進(jìn)行酶聯(lián)反應(yīng)擴(kuò)增，所得到的PCR產(chǎn)物直接行基因測(cè)序，測(cè)序結(jié)果與美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(National Center of Biot

2、echnologyInformation，NCBI)公布的FⅦ基因標(biāo)準(zhǔn)序列比對(duì)，檢測(cè)其基因突變，對(duì)基因突變類型與臨床表型之間的相關(guān)性進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:家系中先證者PT延長(zhǎng)至30.6秒（參考范圍11～14.5秒）、INR:3.38（參考范圍0.8～1.2），凝血酶原活動(dòng)度(PTA):22％(參考范圍70％～130％)，其余均正常。凝血因子活性測(cè)定示:凝血因子Ⅶ活性測(cè)定:6.9％（參考范圍70％～120％），凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ活性

3、測(cè)定均正常。糾正試驗(yàn)顯示:凝血因子Ⅶ抑制物定量:0.0Bethesda(參考范圍＜0.6)，對(duì)照即刻:11.9，患者即刻:35.9，對(duì)照+患者即刻:12.3，對(duì)照37度2小時(shí):12.7，患者37度2小時(shí):40.5，對(duì)照+患者37度2小時(shí):12.9，提示可以糾正和凝血因子缺乏;先證者父母PT正常，凝血因子檢測(cè)分別示49.8％和55.8％（參考范圍70％～120％），僅稍低于正常參考值下限;先證者弟弟和外公凝血功能檢測(cè)均正常。通過(guò)比對(duì)遺傳性

4、FⅦ缺乏癥先證者及其家系其他成員之間的測(cè)序結(jié)果及臨床表型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)先證者FⅦ第9外顯子存在2處雜合突變，Tyr417stop和Trp424stop終止密碼突變，為復(fù)合雜合基因突變，其父親和奶奶在第9外顯子處分別有一雜合基因突變?yōu)門yr417stop。其母親亦檢測(cè)到一雜合基因突變?yōu)門rp424stop。先證者復(fù)合雜合基因突變位點(diǎn)，其中一突變位點(diǎn)與其母親相同，另一突變位點(diǎn)與其父親相同，表明先證者基因突變分別來(lái)自其父母，而其父親基因突變位點(diǎn)與

5、其奶奶基因突變位點(diǎn)相同。先證者弟弟和外公均未發(fā)現(xiàn)第9外顯子基因突變。結(jié)論:遺傳性凝血因子Ⅶ缺乏癥是一種基于FⅦ基因缺陷的罕見(jiàn)的出血性常染色體隱性遺傳性疾病，本家系中先證者Ⅶ基因催化區(qū)第9外顯子處出現(xiàn)雙雜合基因突變，分別為Tyr417 stop和Trp424 stop終止密碼突變，突變基因所編碼蛋白質(zhì)改變，從而導(dǎo)致FⅦ催化區(qū)的空間結(jié)構(gòu)改變，進(jìn)而影響FⅦ穩(wěn)定性和功能，先證者其臨床表現(xiàn)為中度出血癥狀。通過(guò)對(duì)先證者及其家系成員凝血功能、凝血因子