版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、血管重建(remodeling)以血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖、凋亡、遷移為主要特征。研究發(fā)現(xiàn),動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)好發(fā)于血流動力學較為復雜的部位,如血管分支、分叉處和彎曲處,表明低切應力(low shear stress,LowSS)和擾動流是改變血管穩(wěn)態(tài),誘導血管重建,引發(fā)AS的重要因素。研究切應力誘導血管重建及內(nèi)皮細胞(Endotheli
2、al cells,ECs)與VSMCs間相互交流的分子機制,對于深入了解心血管疾病發(fā)生的本質(zhì)具有重要意義。
本實驗室前期研究表明,LowSS條件下,ECs可以以類胰島素生長因子-1(insulin-like growth factors,IGF-1)旁分泌形式調(diào)控聯(lián)合培養(yǎng)的VSMCs功能。然而,在這一過程中,microRNAs(miRs)是否參與并起到何作用尚不清楚。
本文用Ingenuity pathway ana
3、lysis(IPA)分析軟件預測IGF-1調(diào)控的下游miRs。IGF-1重組蛋白靜態(tài)刺激VSMCs后,利用Real-time PCR檢測VSMCs內(nèi)預測得到的miR-133b和miR-378a的變化;應用平行平板流動腔系統(tǒng)對與VSMCs聯(lián)合培養(yǎng)的ECs施加15dyn/cm2的正常切應力(normal shear stres,NSS)和5 dyn/cm2的LowSS,加載時間為12 h,Real-time PCR檢測VSMCs的miR-1
4、33b和miR-378a變化。之后關注對IGF-1及應力均有響應的miR-133b,用miRs預測網(wǎng)站找出其5個可能靶基因,轉(zhuǎn)染技術及Real-time PCR技術驗證,選擇核糖核酸結(jié)合蛋白1(polypyrimidine tract binding protein1,Ptbp1)和N-myc下游調(diào)節(jié)基因1(N-myc downstream regulated1,Ndrg1)進一步研究。Western blotting檢測轉(zhuǎn)染miR-1
5、33b mimics和inhibitor以及IGF-1刺激后VSMCs的Ptbp1與Ndrg1蛋白水平變化,Real-time PCR和western blotting檢測LowSS條件下聯(lián)合培養(yǎng)VSMCs的Ptbp1與Ndrg1變化。EdU流式檢測轉(zhuǎn)染miR-133b mimics和inhibitor對VSMC增殖的影響。
結(jié)果顯示:
?、買GF-1重組蛋白靜態(tài)刺激后,VSMCs的miR-133b和miR-378a表
6、達升高;
?、贚owSS條件下,VSMCs的miR-133b顯著升高,miR-378a表達無明顯變化;
?、凵险{(diào)VSMCs的miR-133b的表達,Ptbp1和Ndrg1的mRNA和蛋白表達水平顯著降低,下調(diào)VSMCs的miR-133b的表達,Ptbp1和Ndrg1的mRNA水平顯著升高,蛋白水平無顯著變化;
?、躄owSS加載或IGF-1重組蛋白靜態(tài)刺激后,Ndrg1表達水平顯著降低,而Ptbp1表達水平無顯著
7、變化;
⑤上調(diào)VSMCs的miR-133b的表達可以促進VSMC增殖。
上述結(jié)果表明,miR-133b在ECs直接感受LowSS刺激后分泌IGF-1影響VSMCs增殖這一過程中起到重要的調(diào)控作用。LowSS條件下,聯(lián)合培養(yǎng)ECs感受力學刺激后分泌IGF-1,并通過旁分泌作用上調(diào)VSMCs的miR-133b的表達,進而抑制其靶基因Ndrg1的表達,最終誘導了VSMCs增殖。本研究提出miR-133b作為一種重要的分子參
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- PDGF-BB調(diào)控的microRNAs在低切應力誘導血管平滑肌細胞增殖中的作用.pdf
- IGF-1對血管平滑肌細胞增殖和凋亡的影響.pdf
- MicroRNA-130a在血管平滑肌細胞增殖及血管重構中的作用.pdf
- bFGF在煙草煙霧誘導大鼠血管平滑肌細胞增殖中的作用.pdf
- Caveolin-1-caveolae在AngiotensinⅡ誘導血管平滑肌細胞增殖中的作用.pdf
- PI3K-Akt信號通路在IGF-1誘導平滑肌細胞增殖中的作用.pdf
- MCP-1誘導血管平滑肌細胞增殖的機制.pdf
- 自噬在低氧誘導的肺血管平滑肌細胞增殖中的作用及apelin調(diào)控機制.pdf
- TRPV1調(diào)控血管平滑肌細胞增殖的作用及其機制研究.pdf
- ROCK亞型在血管平滑肌細胞遷移和增殖中的作用.pdf
- MicroRNA-133a調(diào)控血管平滑肌細胞向成骨樣細胞分化的功能研究.pdf
- 張應變調(diào)控的ACTH在高血壓血管平滑肌細胞增殖中的作用.pdf
- 切應力抑制內(nèi)皮細胞誘導的血管平滑肌細胞遷移及PI3K-Akt的調(diào)控作用.pdf
- 自噬在IFN-γ調(diào)控FasL誘導血管平滑肌細胞凋亡中的作用機制.pdf
- 鈉氫交換體NHE1在高鹽誘導血管平滑肌細胞增殖和鈣離子調(diào)控中的作用.pdf
- Cx43在PDGF-BB誘導的大鼠血管平滑肌細胞增殖中的作用.pdf
- KLF5在AngⅡ誘導的血管平滑肌細胞增殖中的作用及其機制研究.pdf
- 流體切應力和血管平滑肌細胞誘導聯(lián)合培養(yǎng)內(nèi)皮祖細胞的分化及p-Akt的調(diào)控作用.pdf
- MicroRNA-208b調(diào)控血管平滑肌細胞向成骨樣細胞分化的研究.pdf
- CGRP及其受體亞單位RAMP1對血管平滑肌細胞增殖的調(diào)控作用.pdf
評論
0/150
提交評論