樺褐孔菌多糖的結(jié)構(gòu)、抗氧化活性及對慢性胰腺炎的影響.pdf

1、樺褐孔菌在俄羅斯，日本，荷蘭和芬蘭等國家的部分地區(qū)作為偏方緩解疼痛和炎癥已經(jīng)超過4個(gè)世紀(jì)。大量研究表明，樺褐孔菌多糖（Inonotus obliquus polysaccharide）具有抗氧化和抗炎活性，可以緩解結(jié)腸炎、艾滋病和癌癥等疾病。慢性胰腺炎(chronic pancreatitis)是一種由遺傳因素或環(huán)境因素引起的伴隨有疼痛、纖維化、炎癥反應(yīng)及細(xì)胞壞死的疾病。而多糖可以有效緩解代謝疾病并作為益生源調(diào)節(jié)腸道菌群。本研究通過水提

2、-醇沉法提取樺褐孔菌多糖，并使用DEAE-纖維素層析柱和Sephadex G-200層析柱進(jìn)一步純化樺褐孔菌多糖。采用物理和化學(xué)方法分析多糖的結(jié)構(gòu)特征及抗氧化活性。使用二乙基二硫代氨基甲酸鹽(diethyldithiocarbamate，DDC)腹腔注射獲得慢性胰腺炎小鼠，通過小鼠體重變化、胰腺組織切片、羥脯氨酸水平、組織抗氧化能力、代謝相關(guān)酶含量以及細(xì)胞因子水平揭示多糖對慢性胰腺炎的緩解作用。通過小鼠糞便高通量測序結(jié)果分析慢性胰腺炎小

3、鼠腸道菌群變化。本研究獲得以下結(jié)果:
　　(1)采用水提-醇沉法提取獲得樺褐孔菌粗多糖，經(jīng)DEAE-纖維素層析柱純化獲得IOP-Ⅰ、IOP-Ⅱ和IOP-Ⅲ三個(gè)組分，得率分別為38.2％，9.3％和10.5％。IOP-Ⅰ組分得率和多糖含量均最高，故將該組分經(jīng)Sephadex G-200層析柱再次純化。最終獲得IOP的多糖含量為98.6％。
　　(2) IOP為均質(zhì)性的B-吡喃型多糖，分子量為32.5 kDa，單糖組成為甘露糖、

4、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖，其摩爾比為9.8∶13.6∶29.1∶20.5∶21.6∶5.4。
　　(3) IOP濃度為1-5 mg/mL時(shí)，鐵還原能力、DPPH自由基清除活性和羥自由基清除活性都隨IOP濃度的增加而增強(qiáng)，且當(dāng)濃度達(dá)到5 mg/mL時(shí)IOP的DPPH自由基清除活性和羥自由基清除活性均趨近于抗壞血酸。
　　(4) IOP可以提高慢性胰腺炎小鼠體重增長率、SOD、GSH-Px、TAOC以及代謝相關(guān)酶含

5、量，降低羥脯氨酸、MDA和細(xì)胞因子水平，改善小鼠胰腺組織病理程度。這些結(jié)果表明IOP對DDC引誘的慢性胰腺炎小鼠有明顯的緩解作用，且IOP-L、IOP-M和IOP-H三個(gè)劑量組隨著IOP濃度的增加對慢性胰腺炎的緩解作用逐漸增強(qiáng)，IOP-H組效果最好。
　　(5)高通量測序結(jié)果表明，IOP可以有效調(diào)節(jié)腸道菌群的結(jié)構(gòu)及多樣性。聚類分析和主成分分析結(jié)果直觀的說明了DDC引誘擾亂了腸道菌群的結(jié)構(gòu)。在門水平上，DDC引誘減少了Bactero

6、idetes含量，增加了Firmicutes含量。在屬水平上，減少了Lactobacillus，Bacteroides，unclassified S24-7,unclassified Lachnospiraceae,unclassified Prevotellaceae,Roseburia和Prevotella的含量，而增加了Alistipes，ncertae_Sedis，Helicobacter，Parabacteroides和ike