禾谷絲核菌弱毒菌株中的真菌病毒研究.pdf

1、真菌病毒(mycovirus)普遍存在于各類真菌中，并且能夠在真菌體內(nèi)進(jìn)行有效復(fù)制。目前報道的真菌病毒主要分屬于14個科以及一部分未分類真菌病毒，其基因組核酸類型包括dsRNA、(+)ssRNA、(-)ssRNA和ssDNA。大部分真菌病毒對宿主都沒有顯著的影響。近年來在多種植物病原真菌中發(fā)現(xiàn)的許多弱毒相關(guān)的真菌病毒，為真菌病害的生物防治提供了豐富的資源。
　　絲核菌中的禾谷絲核菌(Rhizoctonia cerealis Van

2、 der Hoeven)屬于雙核絲核菌的AG-D融合群，是引起我國小麥紋枯病的優(yōu)勢種群。研究發(fā)現(xiàn)R.cerealis一些菌株中的dsRNA存在豐富的多樣性。但是由于大多數(shù)dsRNA對宿主沒有明顯的影響，目前對于絲核菌尤其是雙核的禾谷絲核菌中的真菌病毒的研究還很少。根據(jù)對弱致病力菌株中提取的dsRNA高通量測序分析顯示，在禾谷絲核菌中包含多種真菌病毒相關(guān)的序列。探索這些序列與弱毒菌株及其弱致病力之間的關(guān)系，明確其與真菌毒力衰退之間的關(guān)系，

3、能夠?yàn)榘l(fā)掘有生防潛力的病毒提供有價值的線索。
　　本研究對采自我國山東的一株禾谷絲核菌弱致病力菌株R1084進(jìn)行了研究。結(jié)合高通量測序結(jié)果，通過克隆測序和RACE方法獲得了線粒體病毒Rhizoctonia cerealismitovirus1-R1084(RcMV1-R1084)的基因組序列并作了初步分析。RcMV1-R1084全長3149bp，G+C含量40.3％，5'UTR533nts，3'UTR為177nts，沒有poly(

4、A)尾巴。無論使用真菌線粒體遺傳密碼還是通用密碼子，RcMV1-R1084都編碼一個相同的ORF，該ORF長度2439bp，編碼812個氨基酸，分子量為91.27 kDa，包含一個線粒體病毒的RdRp保守結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)發(fā)育分析表明RcMV1-R1084的RdRp與Sclerotiniasclerotiorum mitovirus11相似度最高，具有50％的氨基酸序列相似度。這是真菌線粒體病毒在R.cerealis中的首次發(fā)現(xiàn)。
　　

5、對禾谷絲核菌弱致病力菌株R10125中兩個病毒的部分基因組序列進(jìn)行了驗(yàn)證，初步推斷它們可能分別屬于線粒體病毒(Mitovirus)和低毒病毒（Hypovirus），暫時命名為RcMV2/R10125和RcHV1/R10125。其中RcMV2/R10125具有完整的ORF和一個RdRp保守結(jié)構(gòu)域;與RcMV1-R1084的序列差異較大;而RcHV1/R10125還有可能比較長的一段基因組序列尚未獲得。推測在R10125和R1084中可能存

6、在多個線粒體病毒、低毒病毒以及其它病毒共同侵染同一菌株的情況，其中可能就包含具有毒力衰退相關(guān)的真菌病毒。
　　對弱致病力菌株R1084和R10125毒力衰退的原因進(jìn)行初步探索。分析了R1084和R10125菌尖分離后代以及強(qiáng)致病力菌株R0301和中等致病力菌株R0959與R1084和R10125對峙培養(yǎng)后的一些生物學(xué)性狀。結(jié)果表明R10125菌尖分離的后代菌株的菌落形態(tài)、菌絲形態(tài)，生長速率都明顯恢復(fù)，對苗期小麥的致病力有一定程度的