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文檔簡介
1、目的:通過動物實驗,研究不同劑量調(diào)衡方對Foxp+Treg細(xì)胞的影響,用免疫組化法檢測Lewis肺癌荷瘤鼠和H22肝癌荷瘤鼠腫瘤局部微環(huán)境中Foxp3、TGF-β、IL-10三項指標(biāo),闡釋中醫(yī)扶正祛邪療法的優(yōu)勢所在,完善調(diào)衡方治療腫瘤的理論基礎(chǔ),為臨床選藥拓展思路。
方法:本實驗采用Lewis肺癌模型和H22肝癌模型進(jìn)行研究。Lewis肺癌模型建立及處理:將培養(yǎng)好的Lewis肺癌細(xì)胞制成懸液,細(xì)胞計數(shù)為1.3×106/ml,接
2、種在C57BL/6小鼠左前腋下,將接種后的小鼠按隨機(jī)分組原則分為5組,10只/組。于接種后第二天開始灌胃,給藥10天后,摘取瘤塊組織固定于10%中性福爾馬林中,用免疫組化法檢測瘤組織中Foxp3、TGF-β、IL-10表達(dá),結(jié)果采用計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析Foxp3、TGF-β、IL-10陽性率。H22肝癌模型建立及處理:將培養(yǎng)好的H22肝癌細(xì)胞制成懸液,細(xì)胞計數(shù)為1.3×106/ml,接種在昆明種小鼠左前腋下,將接種后的小鼠按隨機(jī)分
3、組原則分為5組,10只/組。接種后第二天開始灌胃,給藥10天后,摘取瘤塊組織固定于10%中性福爾馬林中,免疫組化方法檢測瘤組織中Foxp3、TGF-β、IL-10表達(dá),結(jié)果采用計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析Foxp3、TGF-β、IL-10陽性率。
結(jié)果:調(diào)衡方對Lewis肺癌荷瘤小鼠實驗表明:調(diào)衡方大、中劑量、貞芪對照組與荷瘤模型組比較Foxp3、TGF-β、IL-10的表達(dá)量存在顯著差異(P<0.01),調(diào)衡方小劑量與荷瘤模型
4、組比較Foxp3、TGF-β、IL-10表達(dá)量存在差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);調(diào)衡方對H22荷瘤鼠實驗表明:調(diào)衡方大、中劑量、貞芪對照組與荷瘤模型組比較Foxp3、TGF-β、IL-10的表達(dá)量存在顯著差異(P<0.01),調(diào)衡方小劑量與荷瘤模型組比較Foxp3、TGF-β、IL-10表達(dá)量存在差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);以上結(jié)果提示調(diào)衡方能夠降低Lewis肺癌、H22肝癌荷瘤小鼠瘤組織中Foxp3、TGF-β、IL
5、-10的表達(dá)水平。
結(jié)論:前期實驗證明,對于不同瘤株,調(diào)衡方均具有抑制腫瘤生長及轉(zhuǎn)移作用。本次實驗選取Lewis肺癌和H22肝癌荷瘤模型,從Foxp3+Treg角度出發(fā),探討其對腫瘤微環(huán)境中免疫抑制狀態(tài)的調(diào)控作用;提示調(diào)衡方對荷瘤機(jī)體的影響,可能與其降低腫瘤微環(huán)境中Foxp3、TGF-β、IL-10的表達(dá)量相關(guān),并以此為基礎(chǔ)改善荷瘤體腫瘤局部微環(huán)境的免疫抑制狀態(tài),調(diào)整機(jī)體的免疫功能,從而發(fā)揮抗瘤抑瘤的作用。并且這種治療效果能夠
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